白果内酯治疗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的比较研究.doc
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卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystiscariniipneumonia,PCP)多见于免疫功能低下或缺陷人群。随着肿瘤化疗患者、接受免疫抑制剂治疗的器官移植者、自身免疫病患者以及获得性免疫功能不全患者等高危人群的扩大,特别是1984年发现首例艾滋病人以来,PCP发病率呈急剧增加的趋势。目前防治PCP的主要药物为磺胺甲基异唑(TMP—SMZ)、喷他脒等。这类药物虽能收到较满意的疗效,但存在严重的不良反应或耐药性,因此寻找新的防治PCP的药物是当前重要的研究课题。实验证实,白果内酯对PCP有一定的治疗作用[1]。作者等比较了国产和进口白果内酯治疗PCP的疗效,现将结果报告如下。材料与方法lPCP的建立纯系Wistar大鼠70只,雌性,体重230~270g,由重庆医科大实验动物中心提供(许可证号:四川省医学实验动物管理委员会发医动字第24301045号)。按文献[1]方法建立实验大鼠肺孢子虫肺炎模型。白果内酯www.gjbzwz.com2实验大鼠分组与治疗将PCP大鼠随机分为4组,每组16只,A组:免疫抑制大鼠对照组,不给予任何药物治疗;B组:国产白果内酯(贵州奥方生物技术有限公司,批号010405,95HPLC,粉剂)治疗组,20mg/kg·d×8d腹腔内注射;C组:进口白果内酯(Sigma公司,批号053K1397,95HPLC,粉剂)治疗组,20mg/kg·d×8d腹腔内注射;D组:复方磺胺甲基异曝唑(西南制药股份公司,批号020503,SMZ:TMP=5:1,片剂)治疗对照组,SMZ100mg/kg·d×8d+TMP20mg/kg·d×8d灌胃。连续用药8d后,停药观察1周,第9周处死考核疗效。3疗效考核治疗过程中观察各组大鼠存活状态,记录存活只数,每周称重。实验完成时,杀鼠取肺,去除气管及肺门组织,吸干表面水分后称全肺湿重,将每只鼠的5个肺叶作上下横断,将每一切面在同一载玻片上分散印片,空气干燥,甲醇固定,GMS染色,油镜观察,每一肺叶印片顺序观察100视野,计数肺孢子虫包囊数,计算每肺每视野的包囊均数及每组大鼠的包囊均数。4统计学分析各实验组大鼠的体重、肺重、肺重/体重比值,肺印片每视野包囊均数比较采用方差分析。各治疗组的包囊减少率按下列公式计算:1疗效1.1动物存活状态实验结束时,A组大鼠死亡2只,C组大鼠死亡1只,B组和D组大鼠无死亡。1.2大鼠体重变化各组大鼠治疗前后的体重变化见表1。A组大鼠的平均体重有所下降,其余各治疗组大鼠的体重则有不同程度的增加。统计分析显示,A组大鼠在治疗过程的平均体重差与其他用药治疗组差异存在显著性(P<0.05)。国产和进口白果内酯组差异无显著性(P>O.05)。1.3大鼠肺重、肺重/体重比实验结束时各实验组大鼠的肺重,肺重/体重比见表2。分析发现,对照组大鼠肺重及肺重/体重比均显著高于治疗组(P均<0.05);国产白果内酯组与进口白果内酯组差异无显著性(P>0.05)。1.4肺印片的包囊数各组大鼠肺印片的每视野肺孢子虫包囊均数见表3,治疗组每视野包囊均数低于对照组(P白果内酯组高于进口白果内酯组(P<0.05),进口白果内酯组与磺胺对照组间差异无显著性(P>O.05)。2不良反应各组大鼠均未发生明显的不良反应,局部无化脓,无红肿。讨论目前卡氏肺孢子虫肺炎的治疗仍以SMZ-TMP和喷他脒为主。喷他脒疗效肯定,但有严重的肝肾毒性,并已有耐药病例出现。磺胺类药物目前被列为治疗PCP的首选药物,但不良反应较多,尤其在治疗艾滋病患者并发卡氏肺孢子虫肺炎时,其不良反应率高达5O9/6~7O引。研究发现白果内酯治疗实验大鼠的卡氏肺孢子虫肺炎有一定作用_1],但进口白果内酯的价格高,对白果内酯的开发利用十分不利。白果内酯为银杏叶中有效活性成分之一。银杏(GinkgobilobaL.)系银杏科植物,又名白果,作为药用在我国已有600多年的历史,自2O世纪6O年代以来,国内外学者对银杏的化学成分、药理作用及其应用做了大量的研究工作,业已证明萜内酯是银杏叶中主要的活性成分。银杏萜内酯包括银杏内酯和白果内酯,是具有特异有效的血小板活化因子受体拮抗剂,其他的药理作用也在研究之中。我国银杏资源约占世界总量的7O9/6以上,国外用于制药的原料主要是从中国进口,而我国对银杏的研究和开发利用则滞后于国外。试验证明国产白果内酯和进口白果内酯对卡氏肺孢子虫肺炎均有治疗作用,接受治疗的大鼠体重增加,肺重减轻,肺重/体重比值下降。以上指标反映大鼠经治疗后的恢复情况。评价疗效最有效的指标是衡量肺内孢子虫负荷,观察经GMS染色的肺印片,计数肺孢子虫包囊是目前国内外公认的经典有效的方法。本研究表明,国产和进口白果内酯治疗后的大鼠肺印片平均每视野包囊均数明显减少,与免疫抑制对照组的差异有显著