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§2、大题一.芽胞的特点(1)对高温、干燥、辐射、化学药物有强大的抵抗力。(2)含水量低、壁厚而致密,通透性差,不易着色,折光性强。(3)芽胞内新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,但保持潜在萌发力。(4)不是繁殖器官,一个芽孢萌发只产生一个营养状态的细胞。二.经典柯赫法则(1)特殊的病原菌应在同一疾病中查见,在健康者不存在(2)此病原菌能被分离培养而得到纯种(3)此纯培养物接种易感动物,能导致同样病症(4)自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养三.细菌的毒力因素细菌的毒力因素毒素外毒素(exotoxin)内毒素(endotoxin)侵袭力:定殖--------干扰宿主防御机制---------体内增殖--------体内扩散四.双命名法所谓“双名法”就是每一种细菌的拉丁文名称由属名和种名两部分构成,属名第一个字母必须大写,其余均应小字。整个属名及种名在出版物中应排成斜体。五.内毒素与外毒素的比较种类内毒素外毒素来源革兰阴性菌革兰阳性菌部及分革兰阴性菌存在部位细胞壁成分、细菌裂解后释出活菌分泌或细菌溶解后散出化学成分脂多糖蛋白质稳定性好、160℃2-4小时破坏差、60-80℃30分钟破坏毒性作用较弱、各种内毒素作用大致相同,起休克,发热,等强、对机体组织器官有选择性,引起特殊临床表现抗原性弱,能刺激机体形成抗体,但无中和作用,甲醛处理后不能形成类毒素强,能刺激机体形成抗毒素,经甲醛脱毒后能形成类毒素六.革兰氏染色法基本步骤:(1)结晶紫初染(2)碘液媒染(3)95%乙醇脱色(4)沙黄复染基本原理G+菌:肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细胞仍呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄(石炭酸复红)复染后呈红色。革兰染色的方法:细菌标本固定后,先用结晶紫初染,再用碘液媒染,使之生成结晶紫-碘复合物,然后用95%酒精脱色,最后用稀释的复红复染。可将细菌分成2类,不被酒精脱色仍保留紫色者为革兰阳性菌;被酒精脱色后复染为红色者是革兰阴性菌。用途:细菌形态鉴定、菌种鉴定意义:鉴别细菌:可分为2类、研究细菌对抗生素的敏感性,选择抗菌药物、研究细菌对结晶紫的敏感性、细菌的等电点、指导临床用药有重要意义。七.生物膜的特性(1)生长速度缓慢,而且不均一。细菌生物膜的形成就是在不利环境下形成的,环境的变化对它的影响较小。在膜表面的细菌,由于营养等因素,分裂较快,体积也大,内层则相反。(2)细菌毒力下降毒力强的细菌形成被膜菌后,一般不会使动物致死。(3)耐药性提高(4)逃逸宿主的免疫监视多糖膜能降低免疫细胞和免疫分子的趋化,而使被膜菌与宿主长期共存状态。八.空斑试验将适当浓度的病毒悬液加入单层细胞培养中,当病毒吸附细胞后,再覆盖一层融化的琼脂。病毒在细胞内复制后产生局限性病灶,病灶逐渐扩大,肉眼也能看见,此即空斑试验。九.细胞培养的优点:每个细胞生理特性基本一致,对病毒易感性相等无个体差异,准确性和重复性好可严格执行无菌操作细胞培养本身就能显示病毒的生长特征应用空斑技术可进行病毒的克隆化十.革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较革兰氏阳性菌细胞壁:由肽聚糖和磷壁酸组成革兰氏阴性菌细胞壁外膜(外壁层):位于肽聚糖层的外部。内壁层(周质间隙):紧贴胞膜,仅由1—2层肽聚糖分子构成。革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌细胞壁厚度层次是否含磷壁酸脂多糖对青霉素敏感性对溶菌酶敏感性厚(20-80nm)主要为1层肽聚糖层有无高高薄(10nm)2层,肽聚糖层和外膜层无有低或不敏感敏感性相对较低十一.细菌生长繁殖四个期的特点(1)迟缓期:细菌被接种于培养基后,对新的环境有一个短暂的适应过程。因细菌繁殖极少,故生长曲线平缓稳定,一般为1~4小时。此期细菌菌体增大,代谢活跃,为细菌进一步分裂增殖而合成充足的酶、能量及中间代谢产物。(2)对数期(指数期):此期细菌大量繁殖,活菌数以恒定的几何级数极快增长,持续几小时至几天不等,此期细菌形态、染色和生物活性都很典型,对外界环境因素的作用十分敏感,因此,研究细菌的生物学性状以此期细菌为最好。(3)稳定期:该期细菌总数处于稳定状态,细菌群体活力变化较大。此期细菌死亡数与增殖数渐趋平衡。细菌形态、染色和生物活性可出现改变,并产生很多代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素等。细菌芽孢一般在该期形成。(4)衰亡期:随着稳定期发展,细菌繁殖越来越缓慢,死亡细菌数明显增多,与培养