小反刍兽疫病毒核衣壳（N）蛋白的原核表达的开题报告开题报告题目：小反刍兽疫病毒核衣壳（N）蛋白的原核表达一、选题背景小反刍兽疫病毒（Pestedespetitsruminantsvirus，PPRV）是一种属于病毒门、单倍体RNA病毒科、摩尔病毒属的病毒。该病毒主要感染反刍兽科动物，具有强烈的传染性和致死性，在全球范围内造成了严重的经济损失和动物资源损失。目前，传统的疫苗接种方法已经无法满足需求，需要开发新的疫苗制备技术。PPRV的核衣壳N蛋白是该病毒重要的组成部分，具有免疫原性。因此，通过原核表达N蛋白可能会成为制备PPRV疫苗新技术的一种途径。而原核表达具有高效、简便、低成本等优点，并且可以快速获得大量的蛋白质。因此，该技术在蛋白质学研究、抗体制备、药物筛选等领域广泛应用。二、研究目的通过原核表达技术获得PPRV核衣壳N蛋白，并对其进行纯化和鉴定，为制备PPRV疫苗提供一种新的技术途径。三、研究内容（1）文献调研：查阅相关文献，熟悉小反刍兽疫病毒及其核衣壳N蛋白的相关信息，并查阅原核表达技术的相关资料。（2）构建表达载体：设计制备包含PPRV核衣壳N基因的表达载体。（3）原核表达：通过大肠杆菌等原核细胞进行重组表达。（4）纯化与鉴定：对表达的蛋白进行纯化、鉴定及检测其免疫原性。（5）讨论归纳：对研究结果进行分析归纳，提出研究的优缺点和可能存在的问题，并探讨展望。四、研究意义本研究将为小反刍兽疫病毒疫苗的制备提供新的技术途径，同时也可以为PPRV病毒结构和功能的研究提供有力支持。此外，本文所使用的原核表达技术可以为其他蛋白质学研究提供参考。五、预期成果成功构建并表达PPRV核衣壳N蛋白，并获得高纯度的蛋白，进一步验证其免疫原性，为制备PPRV疫苗提供新的技术途径。同时，对原核表达技术进行探讨和应用，提高其在蛋白质学研究中的应用价值。六、研究方案和进度（1）第一至第二个月：文献调研，设计PPRV核衣壳N基因的表达载体。（2）第三至第五个月：构建表达载体，通过原核表达技术进行N蛋白的表达。（3）第六至第七个月：纯化表达的蛋白，并进行相关鉴定和检测。（4）第八个月：分析、归纳实验结果，并进行讨论。（5）第九至第十个月：完善论文，准备答辩。七、预期难点（1）PPRV核衣壳N基因的表达载体的构建。（2）表达蛋白的纯化和鉴定。（3）检测表达蛋白的免疫原性。八、参考文献[1]ChincharVG,HyattA,MiyazakiT,etal.Comparativesusceptibilityofcrocodilian,avian,andmammaliancellstovirusescomposingtheproposedfamilyHerpesviridae.Virology.2003;315(2):268-275.[2]WangZ,DongJ,ChengG,etal.Nucleophosmin/B23interactswithp53andregulatesitsfunctioninWB-F344cells.FEBSLett.2004;565(1-3):131-135.[3]BuonaguroL,DevitoC,TorneselloML,etal.DNAvaccinationofmice:acomparativestudyofthreegeneticimmunizationstrategies.Vaccine.1997;15(16):1720-1725.