Ⅰ群禽腺病毒JS株Ⅲa蛋白的原核表达及其单克隆抗体的研制的开题报告.docx
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Ⅰ群禽腺病毒JS株Ⅲa蛋白的原核表达及其单克隆抗体的研制的开题报告题目:Ⅰ群禽腺病毒JS株Ⅲa蛋白的原核表达及其单克隆抗体的研制一、研究背景和意义:Ⅰ群禽腺病毒是一种主要危害家禽健康和养殖业发展的病毒。该病毒具有强烈的传染性和致死性,可引起家禽呼吸道疾病、消化道疾病、神经系统疾病等。病毒的Ⅲa蛋白是其外壳蛋白,能够诱导免疫应答,是研究禽腺病毒免疫学和病毒学的重要对象。因此,本研究旨在利用原核表达技术表达Ⅲa蛋白并制备其单克隆抗体,为研究禽腺病毒的免疫学和病毒学提供重要工具,为禽腺病毒的防治提供理论依据。二、研究方法:1.构建Ⅰ群禽腺病毒JS株Ⅲa蛋白原核表达载体。2.将该载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)宿主细胞中,利用IPTG诱导蛋白表达。3.采用电泳、Westernblotting等技术对表达的异源蛋白进行鉴定。4.准备Ⅲa蛋白的多肽抗原并免疫小鼠,制备单克隆抗体。5.用Westernblotting等方法测试单克隆抗体的特异性和敏感性。三、研究预期结果:1.成功构建Ⅰ群禽腺病毒JS株Ⅲa蛋白原核表达载体。2.实现Ⅲa蛋白在大肠杆菌中的表达。3.成功制备Ⅲa蛋白的单克隆抗体。4.单克隆抗体具有特异性和高敏感性。四、研究进度安排:1.前期实验(一个月):构建Ⅰ群禽腺病毒JS株Ⅲa蛋白原核表达载体,转化大肠杆菌等实验。2.中期实验(两个月):IPTG诱导蛋白表达,采用电泳、Westernblotting等技术鉴定表达的异源蛋白。3.后期实验(三个月):制备Ⅲa蛋白的多肽抗原并免疫小鼠,制备单克隆抗体。测试单克隆抗体的特异性和敏感性。4.论文撰写及提交(两个月):完成实验数据分析,论文撰写及提交。五、研究经费来源:本研究经费来源为学院科研基金,预计总经费为30万元。六、研究期限:本研究期限为12个月。
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