一、消毒与灭菌的区别：所谓灭菌就是杀死一切微生物，包括微生物的营养体和芽孢。消毒是指消灭一切致病微生物（病原体）。二、消毒与灭菌在发酵工业中的应用牛奶巴氏消毒法：80-95℃，10min发酵培养基的灭菌:121℃,20min三、灭菌方法：1、干热灭菌：灼烧灭菌；加热方式有电热、红外线加热等；相对与湿热灭菌，干热要求时间长，温度高（一般160℃，2hr）1）火焰焚烧法：接种环、试管口等2）干烤法：利用热空气灭菌用法：160℃,2小时特点：由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死。所以温度高、时间长。2、湿热灭菌：蒸气释放热量，使微生物蛋白质变性。特点：温度低、时间短、灭菌效果好原因：1)菌体内含水量越高，则凝固温度越低；2)蒸汽冷凝会放出潜热；3)饱和水蒸汽穿透力强；4)湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，主要破坏氢键结构。湿热灭菌优点：1）蒸气来源易，低价无毒；2）蒸气穿透力强灭菌彻底；3）蒸气冷凝释放热量；4）蒸气易输送，易调节，易管理。湿热灭菌缺点：1）设备费用高；2）不能用于怕受潮的物料；3、射线灭菌法：1）电离辐射：χ、γ、β射线。原理：引起水和其他物质的电离，产生游离基，破坏DNA，从而造成细胞损伤。特点；穿透力强，无专一性，对所有生物均有杀伤作用。适用：菌种诱变。2）非电离辐射（紫外线）方法：在波长265-266nm处，杀菌力最强。原理：（1）作用于DNA，使同链DNA相邻嘧啶间形成嘧啶二聚体，引起DNA结构变形，阻碍正常的碱基配对，从而造成菌的变异或死亡。（光复活酶可修复）（2）有氧时产生过氧化氢，强氧化杀菌。适用：空气、水的消毒杀菌（紫外灯）。特点：穿透力差。3.过滤灭菌法4、化学药品灭菌（2）醇类：乙醇：70-75%杀菌效率最高机理：具脱水作用，能穿透菌体进入蛋白质分子肽链间隙，使蛋白质变性或脱水沉淀，造成微生物死亡。无水乙醇：表面蛋白凝固，保护膜，杀菌力差甲醇可使眼睛失明，故不宜做消毒剂；其他醇因不溶于水，一般不用。（3）醛类：甲醛：机理：蛋白质烷化剂；应用：福尔马林（40%）；10%的甲醛熏蒸，用于空气灭菌。（4）表面活性剂：可降低表面张力效应的物质。机理：使菌体细胞膜破损；使菌体蛋白质变性。种类：洗必泰、新洁尔灭等特点：快速、彻底、效率高（5）氧化剂类：机理：破坏蛋白质的巯基，强氧化剂可破坏蛋白质的氨基与酚羟基碘酒7gI：5gKI，溶于100ml95%乙醇。1%碘酒10min可杀死芽孢杆菌和部分真菌，并使流感病毒灭活。漂白粉（氯化钙与次氯酸钙的混合物）（6）重金属及其化合物：所有重金属盐Cu、As、Ag、Hg等对微生物均有毒性。机理：1）可与酶蛋白的-SH基结合，使酶失活；2）易与带阴电荷的菌体蛋白吸附，使之变性沉淀。应用：波尔多液、红汞、硝酸银等。特点：简便。但使用应谨慎，防止在体内积累。（7）pH的杀菌作用酸:蛋白质变性无机酸:杀菌力与H+浓度成正比。有机酸:与不电离的部分成正比,故有时有机酸的灭菌效果>无机酸，分子杀菌力大于离子。碱:强碱造成蛋白质、核酸大分子变性、水解，使菌死亡。2）抗代谢药物3）抗生素抗生素作用机理：1）对细胞壁形成有抑制作用；（如：青霉素）2）影响细胞膜功能；（如：多粘菌素）3）抑制蛋白质合成；（如：绿霉素、链霉素）4）干扰核酸代谢；（如：利福霉素、灰黄霉素）抗药性：变异、适应、进化原因：药物无效；药物被修饰；R质粒（药物抗性基因）二、湿热灭菌的原理2.微生物的热致死动力学：对数残留定律。菌体是一个复杂的高分子体系，其受热被杀死，主要的原因是高温能使蛋白质变性，这种反应属于单分子反应（一级反应），因此，杂菌在一定温度下受热死亡的过程可用单分子反应历程加以描述。-dN/dt=k*N式中dN/dt：表示灭菌过程中某瞬间活菌的减少速率N：表示表示灭菌过程中某瞬间的活菌数K：表示灭菌过程中菌体死亡的速度常数上式的积分形式为：t=（2.303/k）×lnN0/Nt式中——N0，Nt：分别表示灭菌前、灭菌后培养基中菌体的浓度（个/ml）灭菌时间t取决于污染程度N0、灭菌程度Nt与灭菌速度常数K灭菌程度：对于Nt，如果取Nt=0，那么，t=∞，这显然是与现实情况不符。对于如何Nt取值？通常取Nt=10-3，即灭菌1000次，有一次是失败的，残留了一个活菌体。这个数值的取值的大小，也间接反应了该生产过程中的技术管理水平。3.热致死反应的速度常数KK是表达微生物耐热性的特征常数，K除了决定于菌体的种类及存在形式外，还是温度的函数（与普通化学反应一样），因此灭菌温度的选择是灭菌操作的核心。K越小，该微生物越耐热，121℃