培养基的配制高压蒸汽灭菌操作.ppt
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第三章微生物人工培养技术二、微生物的生长2.细菌群体生长规律(1)迟缓期此期是细菌在新鲜培养液中适应环境和准备繁殖时期,是细菌的一个适应阶段。特点:分裂迟缓,菌体增大,代谢活跃。(2)指数生长期是细菌分裂繁殖最快的时期,细菌按几何级数增加。特点:代谢旺盛,生长迅速.形态和生理特性较稳定.较典型,且对环境因子的作用较为敏感。(3)稳定期此期细菌的性状逐渐发生改变,繁殖数与死亡数几乎相等。特点:有益和有害的代谢产物都在积累。细菌性状发生改变,芽胞开始产生。(4)衰退期细菌死亡数超过繁殖数,活菌数逐渐减少。特点:菌体出现变形,自溶等现象。(二)真菌的生长繁殖(三)环境对微生物生长的影响三、灭菌原理是通过相应的手段来抑制或消灭有害微生物2.辐射灭菌是利用电磁辐射产生的电磁波杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法。(2)电离辐射杀菌原理3.超声波超声波是频率超过200000HZ的高频声波,一般通过它来处理微生物悬液。当处理悬液时,由于超声波探头的高频振动,能使浮液内产生空穴,空穴内处于真空状态,只要悬液中的细菌进入空穴区,就会因压力差而裂解。4.滤过除菌滤过除菌是用滤菌器阻留过滤液体和气体的细菌。滤器的除菌能力取决了滤板的孔径大小,一般为0.22-0.45μm,常用于不耐热的血清,抗毒素,生物药品等的除菌。5.高渗作用大多数生物进入渗透压较高的溶液中时,细胞脱水,从而发生质壁分裂,微生物的生长受抑制甚至引起死亡。日常生活中高浓度的盐液(10%-50%)或糖液(50%-70%),使微生物处在高渗环境下产生质壁分离,生长受到抑制。此法可用来长期保存食物。(二)化学物质消毒剂和防腐剂2.抗生素抗生素是生物在其生命活动过程中产生的一种次生代谢产物或其人工衍生物,它在低浓度时就能抑制或影响它种生物的生命活动。主要作用机制有以下几种:①抑制细胞壁的合成,如青霉素,头孢菌素等;②改变细胞膜的通透性,抑制细胞膜的功能,如短杆菌肽,多粘菌素;③抑制菌体蛋白质的合成;如链霉素,四环素,卡那霉素;④抑制核酸合成,如新生霉素,利福霉素等。第二节培养基的配制各种检验培养基图片2培养基的配制录像第三节灭菌消毒操作几种常见的高压蒸汽灭菌锅结构一几种常见的高压蒸汽灭菌锅结构(二)1.加水打开灭菌锅盖,向锅内加水至相应的标示高度。2.加入待灭菌物品将待灭菌物品加入至灭菌桶内,注意物品不要堆放太紧或紧靠锅壁。物品排列要疏松,并用一定的方法包扎。3.盖好锅盖将盖上的软管插入灭菌桶的槽内,加盖,对齐上、下栓口,以对角方式均匀旋紧螺栓,使锅盖紧闭。4.排放锅内冷空气打开放气阀,加热。自锅内开始产生持续的高温蒸汽3min后再关紧放气阀。5.升温灭菌待压力逐渐上升至所需温度时,控制热源,维持所需温度和压力达所需时间(121℃×15min,121℃×30min或116℃×40min)后,关闭热源,停止加热。6.灭菌后开盖取物待压力降至“0”时,慢慢打开放气阀,开盖,立即取出灭菌物品。斜面培养基取出后要趁热摆成斜面,灭菌后的玻璃仪器需烘干或晾干。7.除去锅内剩余水分灭菌完毕,应除去锅内剩余水分。二、高温干烤灭菌操作三、滤过灭菌操作各种细菌过滤器图四、紫外线灭菌操作总结:1.微生物的营养要素几生长条件2.培养基的种类几常用培养基的配制。3.高压蒸汽灭菌操作。作业:1、微生物的营养物质有几大类?生活条件有哪些?2、微生物生长有什么规律?3、常用的消毒灭菌方法有哪些?高压蒸汽灭菌如何操作?4.培养基配制过程中应注意什么事项?