会计学第四章放射性核素标记化合物第一节概述二、放射性核素标记化合物（一）放射性核素标记化合物的特点二、放射性核素标记化合物（一）放射性核素标记化合物的特点（二）同位素标记与非同位素标记（2）非同位素标记(non-isotopiclabelling)：非固有元素131I---蛋白质、125I---蛋白质125I---类固醇激素特点：组成不完全相同物理化学及生物特性有所改变（三）放射性核素标记化物的命名（3）均匀标记（Uniformlabeling）U-14C-葡萄糖（4）全标记（Generallabeling）G-3H-胆固醇（5）双标记或多标记（Doublelabelingandmultipedlabeling）C3H3-35S-CH2CH2CH(NH2)-COOH13CH3-14COOH放射性比活度Specificactivity放射化学纯度Radiochemicalpurity（五）不稳定性1.核衰变2.辐射自分解3.脱落4.位移碘标记化合物的基本特性125I、131I、123I:半衰期、能量适宜125I、131I：价廉易得125I：易于探测碘标记化合物的基本特性一、蛋白质与多肽的放射性碘标记技术特点：苯环比直链易于标记且稳定（一）基本原理形式：Na*I--*I----*I2或*I+（二）常用标记方法分类：直接标记法间接标记法Na*I氧化剂*I2或*I+酪氨酸残基1.直接标记法(1)氯胺T法氯胺T法注意事项①氯胺T溶液应新鲜配制②氯胺T用量应严格控制③偏重亚硫酸钠也应新鲜配制、倍于氯胺T④磷酸缓冲液⑤减少反应体积⑥反应时间：10s-3min⑦室温进行1.直接标记法（2）乳过氧化物酶法乳过氧化物酶法注意事项1.直接标记法(3)固相氧化剂法1.直接标记法(3)固相氧化剂法②氯甘脲(Iodogen)法1，3，4，6-四氯3α,6α-二苯甘脲将氯甘脲用氯仿溶解后涂于反应管底部，用N2气吹干，置-20oC冷藏备用。③Iodo-Beads法将氯胺T的衍生物N-氯苯磺胺共价连接到无孔的聚苯乙烯小珠表面。①固相酶法②氯甘脲(Iodogen)法③Iodo-Beads法1.直接标记法(4)N-溴替丁二酰亚胺(N-Bromosuccinimide)三、蛋白质与多肽的放射性碘标记技术1.直接标记法(1)氯胺T法(2)乳过氧化物酶法(3)固相氧化剂法①固相酶法②氯甘脲(Iodogen)法③Iodo-Beads法(4)N-溴替丁二酰亚胺2.间接标记法2.间接标记法优缺点二、核酸的放射性碘标记技术第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定特定组分峰的各段放射性之和①标记率（%）=——————————×100%全层析谱各段放射性之和第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定第三节放射性标记化合物的纯化与鉴定（四）生物活性和免疫活性的测定三、标记化合物的辐射自分解与对策H2O三、标记化合物的辐射自分解与对策三、标记化合物的辐射自分解与对策同位素标记与非同位素标记蛋白质与多肽的放射性碘标记技术的方法标记化合物的提纯