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第三章血栓与止血检测DetectionofThrombosisandHemostasis血管中流动的血液为什么不凝固?破损的血管为什么能止血?止血与凝血简要机理第一节血管壁检测1.血管壁的完整性血管内皮细胞之间及内皮下胶原(Vitc)2.血管内皮下层良好的弹力纤维---保持血管壁的柔韧性健全的神经纤维---维持血管壁的舒缩性带负电荷的胶原纤维---启动凝血过程3.血管内皮细胞产生vWF、纤维结合蛋白、组织因子、内皮素正常血管壁抗血栓形成能力一、筛检试验出血时间束臂试验二、诊断试验血管性血友病因子抗原测定血管性血友病因子活性测定6-酮-前列腺素F1α测定血浆凝血酶调节蛋白抗原测定一、出血时间(bleedingtime,BT)[方法][意义][意义]二、毛细血管抵抗力试验(capillaryresistanceTest,CRT)[方法]血压计袖带上臂加压8min在前臂直径5cm圆圈内计数出血点[参考值]男性0-5个女性0-10个[意义]本实验观察血管壁、血小板的综合止血作用1.异常提示:毛细血管脆性、通透性2.常见于:①血管壁结构与功能异常(HHT、过敏性紫癜)②血小板质(GT)与量(ITP)异常③血管性血友病(vWD)④其他:高血压、糖尿病等三、血管性血友病因子抗原测定(vWF:Ag)【参考值】Laurell免疫火箭电泳法:94.1%±32.5%。Elisa法:70%-150%【临床意义】血管内皮细胞的促凝指标之一。①减低:见于vWD,是诊断vWD及其分型的指标之一。②增高:见于血栓性疾病及血栓性前状态,如心肌梗塞、心绞痛、脑血管病变、糖尿病等。vWF↓——vWD★第二节血小板检测1.粘附功能(adhesionfunction)指血小板具有粘附于血管内皮下胶原及其他异物表面的能力需要物质GPIb-ⅨvWFIII型胶原纤维结合蛋白(Fn)指活化后的血小板与血小板之间相互连接的特性参加因素GPIIb/IIIa纤维蛋白原钙离子聚集诱导剂:ADP、肾上腺素、TXA2、花生四烯酸粘附与聚集的结果3.释放功能:(releasereaction)PF3提供凝血因子催化表面血小板止血功能(小结)筛检试验血小板计数血块收缩试验诊断试验血小板相关免疫球蛋白测定血小板黏附试验血小板聚集试验血小板P-选择素测定血小板促凝活性测定血浆血栓烷B2测定[参考值][意义]一、血小板相关免疫球蛋白测定(PAIg)【临床意义】1.PAdT增高见于血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗塞、心绞痛、脑血管病变、糖尿病、DVT、妊高征、肾小球肾炎、肺栓塞、口服避孕药等。2.PAdT减低见于vWD、巨大血小板综合征、血小板无力症、尿毒症、肝硬化、异常蛋白血症、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性白血病、服用抗血小板药物等。三、血小板聚集试验(PAgT)第三节凝血因子检测分为三个阶段,两个途径(内源性、外源性)目前公认的凝血因子共14个,按罗马字命名的有12个,尚有高分子量激肽原(HMWK),激肽释放酶原(PK)大多数由肝脏产生,其中II、VII、IX、X合成依赖于Vitk,称Vitk依赖因子正常情况下,所有因子都处于无活性状态IIaCa2+VIII---------------VIIIaIIIPlt------------------PF3Ca2+IIaXaV——————————————VaCa2+Ⅰ纤Ⅱ凝Ⅲ活素Ⅳ钙Ⅴ易Ⅹ斯特ⅧⅨⅪ甲乙丙Ⅻ接触ⅦXIII稳定ⅪⅫ进酒(Ⅸ)吧(Ⅷ)(内源)失(Ⅹ)吾(Ⅴ)而(Ⅱ)亦(Ⅰ)(共同)ⅢⅦ(外源)筛检试验活化部分凝血活酶时间(APTT)凝血时间(CT)血浆凝血酶原(PT)诊断试验血浆纤维蛋白原定量血浆因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝活性测定血浆因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性测定血浆因子ⅩⅢ定性试验可溶性纤维蛋白单体复合物测定[原理]XII因子活化剂Ca2+、磷脂(替代PF3)血浆[参考值]手工法31-43秒>正常对照10s以上者延长延长:1.主要检测内源性途径的凝血因子缺陷(如Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ/血友病甲、乙、丙)2.其次检测第二、三阶段因子,如凝血酶原、纤维蛋白原3.严重肝病、DIC4.循环中抗凝物质增多5.普通肝素应用的首选监测指标(60-100%)缩短:血栓性疾病和血栓前状态[意义]三、血浆凝血酶原时间测定(Prothrombintime,PT)[意义]四、血浆因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝活性测定2.降低FⅧ:C减低:见于血友病A、vWD、DIC等;FⅨ:C减低:见于血友病B、肝脏疾病和维生素K缺乏、DIC等FⅪ:C减低:见于因子Ⅺ缺乏症、肝脏疾病、D