实验5 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制.ppt
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实验五琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制【实验目的】了解丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。在生物体外,可以人为地提供无氧的条件进行实验,反应中生成的FADH2可使氧化型美蓝(蓝色)转变成还原型美蓝(无色)。因此,可以从美蓝的颜色变化观察琥珀酸脱氢酶的作用。【器材与试剂】(一)器材1.恒温水浴锅2.手术剪3.研钵4.试管5.试管架6.刻度吸管7.漏斗8.小白鼠的肌肉9.脱脂棉10.吸水纸(二)试剂1.0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.4)2.0.02mol/L丙二酸钠溶液3.0.02mol/L琥珀酸钠溶液4.0.01%美蓝溶液5.生理盐水6.液体石蜡【实验步骤】1.制备肌提液(酶液):取新杀死的动物肌肉3~5g,加冷的磷酸缓冲液研磨,过滤,低温保存,备用。3.将各试管摇匀,倾斜试管,沿管壁滴加液体石蜡5滴,盖在液面,以隔绝空气。置于370C水浴中保温,随时观察各管中美蓝的褪色情况,并记录时间,解释结果。【要点提示】【思考题】