基于大概念下的专题突破微专题1微生物的培养技术及应用1．(2023·山东卷)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是()A．不含氮源的平板不能用于微生物培养B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物解析：D不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误；平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，B错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而进行生长繁殖，不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。2．(2023·广东卷)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是()A．a点时取样、尿素氮源培养基B．b点时取样、角蛋白氮源培养基C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基D．c点时取样、角蛋白氮源培养基解析：D研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效降解角蛋白，所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养。(1)(2021·江苏卷)将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率。(×)(2)(2021·天津卷)用免洗酒精凝胶擦手能达到灭菌目的。(×)(3)(2023·新课标卷，节选)从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是_______________________________。提示：由根瘤菌繁殖形成的单菌落1．微生物培养中的无菌操作技术2．培养物、纯培养物、纯培养的辨析3．培养基制备与微生物纯化技术提醒：①各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求；②为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物实验一般会设置空白对照：随机取若干个灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。4．微生物分离与计数的实例命题点围绕微生物的培养与计数考查生命观念及科学探究1．(2023·山东聊城三模)研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素A与B的培养基中(＋代表含抗生素，＋多少代表抗生素浓度，－代表不含抗生素)，对两种抗生素药性分析。在37℃环境下培养24小时后，细菌生长情况如图。下列说法错误的是()A．为排除杂菌的影响，倒平板前需对培养基采用湿热灭菌B．该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培养C．长期使用抗生素A可能会增加结核杆菌的抗药性基因频率D．与单独使用抗生素A相比，联合使用抗生素B可显著增强对结核杆菌的抑制作用解析：D为排除杂菌的影响，应该用湿热灭菌法对培养基进行灭菌，然后冷却到50℃左右倒平板，A正确；如图，菌落分布均匀，是利用了稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培养，B正确；长期使用抗生素A，在抗生素A的选择作用下，结核杆菌的抗药性基因频率可能会增加，C正确；根据图中平板上菌落的分布可知，与单独使用抗生素A相比，联合使用抗生素B不能增强对结核杆菌的抑制作用，D错误。2．(2023·山东潍坊二模)某研究团队从食塑料蜡虫肠道中分离能降解聚乙烯(PE)的细菌，以解决塑料污染问题。将分离得到的两种细菌(YT1和YP1)在PE薄膜培养液中培养，培养液中细菌数量变化以及PE失重率(降解PE能力的高低)变化如图所示。下列叙述正确的是()图1图2A．用经湿热灭菌后的含PE、葡萄糖和无机盐等成分的液体培养基分离目的细菌B．分离得到目的细菌的纯培养可用平板划线法在酸性的选择培养基上进行C．在得到图1曲线过程中的计数常用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法D．在第20天后两种细菌群体降解PE的能力差异增大，且细菌YT1强于细菌YP1解析：C分离目的细菌要用PE为唯一碳源的固体培养基，不加葡萄糖，A错误；培养细菌应在中性或碱性环境中培养，B错误；对微生物进行计数，得到图1曲线过程中的计数常用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法，C正确；由20天后PE失重率变化曲线可知，YP1明显高于YT1，即细菌YP1降解PE的能力强于细菌Y