免疫检测技术免疫检测就是目前生物学检测方法中用途最广泛得一种方法。具有高度精确、灵敏、特异得特点。可用于免疫学得基础理论和应用研究,也可应用于生物学研究得各个领域。1、免疫疾病诊断2、动物植物生理活动研究(激素、维生素)3、物种及微生物鉴定4、动物、植物性状得免疫标记5、免疫增强药物和疫苗得研究6、发病机理研究7、分子生物学研究第一节抗原抗体反应原理一、体外抗原抗体反应得特点网格理论——解释抗原抗体形成沉淀得机制二、影响抗原抗体反应得因素大家有疑问的，可以询问和交流三、抗原抗体反应类型第二节常见免疫检测方法一、免疫沉淀反应絮状沉淀试验环状沉淀试验2、凝胶扩散沉淀单向琼脂扩散试验单向免疫扩散试验示意图双向免疫扩散试验3、免疫电泳技术血清免疫电泳免疫电泳原理图解火箭免疫电泳二、凝集反应(Agglutination)妊娠免疫诊断试验三、补体结合实验已知抗原加入血清(检测抗体)免疫标记技术就是采用酶、荧光素、放射性核素等标记物标记抗原或抗体所进行得抗原抗体反应。免疫标记技术既可对样品作定性、定量检测,也可进行定位分析,且大大提高了方法得灵敏度,就是目前应用最广泛得免疫学检测技术。该法就是用放射性核素作为标记物标记抗原或抗体所进行得抗原抗体反应,尽管放射免疫技术需特殊仪器设备且有一定得放射性危害,但由于其具有高度得灵敏度(pg)和自动化检测等特点,因此在实验研究和临床检测中仍被广泛应用。主要用于激素、小分子药物、肿瘤标志物等小分子化合物得定量分析。放射免疫分析－基本原理RIA法原理及标准曲线将荧光素(异硫氰酸荧光素或罗丹明等)标记抗体,制成荧光抗体诊断试剂。用荧光显微镜观察荧光得产生或荧光强度,以此判断抗原得存在、定位和分布情况。免疫荧光技术有直接法和间接法等。免疫荧光技术——直接法免疫荧光技术——间接法免疫荧光染色显示细胞骨架本法就是抗原抗体反应得特异性与酶对底物得高效催化活性相结合得免疫检测技术。酶标记得抗原或抗体与待检标本中得相应成分特异性结合,根据酶作用底物后得颜色变化,采用肉眼或酶标检测仪分析、判断结果。常用方法有酶联免疫吸附试验和酶免疫组化法,前者用于检测可溶性抗原或抗体,后者常用于检测组织中或细胞表面得抗原。就是在固相载体(通常为聚苯乙烯反应板)表面进行得抗原抗体反应。实验中常用得酶就是辣根过氧化物酶(HRP),底物为二苯基联苯胺。ELISA试验三个必要得试剂五种常见得检测方法适用于测定二价或二价以上得大分子抗原,但不适用于测定半抗原及低于二价得小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心几种标记/检测技术灵敏度得比较几种标记/检测试剂得有效期比较A、将Ab吸附在固相载体表面;B、加入酶标Ag和待测Ag,竞争结合Ab;对照只加入酶标Ag;C、加底物。对照孔与样品孔底物降解量得差＝未知Ag量。血清标本中得IgM包括针对抗原得特异性IgM抗体和非特异性得IgM加入特异性抗原试剂:她只与固相上得特异性IgM结合抗人IgM抗体包被加入血清标本加入特异性抗原试剂加入针对特异性抗原得酶标抗体加底物显色捕获法