会计学1.1离心(líxīn)技术？？？影响颗粒在离心场中的沉降速度的因素有：颗粒半径rp、颗粒形状（影响摩擦力f）、颗粒与介质的密度差（p-m）、一定温度条件(tiáojiàn)下悬浮介质的粘度系数（）、离心加速度2r。在确定的离心操作中，沉降速率则主要取决于悬浮颗粒受到离心力的大小。①离心力（centrifugalforce，Fc）离心作用是根据(gēnjù)在一定角度速度下作圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力进行的。离心力（Fc）的大小等于离心加速度ω2r与颗粒质量m的乘积，即：ω：是旋转角速度(弧度/秒)；r：颗粒离开旋转中心的距离(cm)；m：质量(克)。②相对离心力（relativecentrifugalforce，RCF）离心力因离心管至旋转轴的距离不同而不同，因此用“相对离心力”表示离心力，若RCF值不变，一个(yīɡè)样品可在不同的离心机上获得相同的结果。RCF是离心场转化为重力加速度的倍数。r：离心转子(zhuànzǐ)的半径距离（cm）；g：重力加速度（980cm/sec2）；rpm：转子(zhuànzǐ)每分钟的转数。Dole和Cotzias制作了与转子速度和半径相对应的离心力的转换(zhuǎnhuàn)列线图。在用图将离心机转数换成相对离心力时，先在离心机半径标尺上取已知的离心机半径和在转数标尺上取已知的离心机转数，然后将这两点间划一条直线，在图中间RCF标尺上的交叉点，即为相应的离心力数值。例已知离心机转数为2500rpm，离心机的半径为7.7cm，将两点连接起来交于RCF标尺，此交点(jiāodiǎn)500×g即是RCF值。相对离心力(×g)RCF=1.119×10-5×r×rpm2。离心分离方法(fāngfǎ)差速离心的分辨率不高，沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于其他分离(fēnlí)手段之前的粗制品提取。关键是选择适合于各分离(fēnlí)物的离心力。例如用差速离心法分离(fēnlí)已破碎的细胞各组份。/速率(sùlǜ)区带离心法离心后在近旋转轴处（r1）的介质密度最小，离旋转轴最远处（r2）介质的密度最大；但介质最大密度必须小于样品中粒子的最小密度，即ρP＞ρm。这种方法是根据分离的粒子在梯度(tīdù)液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度(tīdù)层内分成一系列区带，达到彼此分离的目的。/等密度(mìdù)离心法当管底介质的密度大于粒子的密度，即ρm＞ρP时粒子上浮；在管顶处ρP＞ρm时，则粒子沉降，最后粒子进入到一个它本身的密度位置即ρP＝ρm，此时dx/dt为零，粒子不再移动，粒子形成纯组份的区带。与样品粒子的密度有关，而与粒子的大小(dàxiǎo)和其他参数无关。体系到达平衡状态后，延长离心时间和提高转速也不能改变粒子的成带位置。但提高转速可缩短达到(dádào)平衡的时间，离心所需时间以最小颗粒到达等密度点（即平衡点）的时间为基准，有时长达数日。此法一般应用于物质的大小相近，而密度差异较大时。常用的梯度液是CsCl2。/离心(líxīn)设备离心机的种类(zhǒnglèi)普通离心机以交流电动机驱动(qūdònɡ)，电机碳刷易磨损，利用电压调压器调节转速，起动电流大，速度升降不均匀，一般转头是置于一个硬质钢轴上，因此必需进行精确平衡，以免损坏离心机。高速(ɡāosù)离心机：转速20000~25000rpm，RCF可达89000g，最大容量可达3升，分离形式是固液沉降分离。超速离心机：转速50000~80000rpm，RCF可达600000g；离心容量由几十ml至2L，分离的形式(xíngshì)是差速沉降分离和密度梯度区带分离，可进行亚细胞器分级分离，病毒、核酸、蛋白质和多糖等生物大分子的分离。按性能可分为分析型、制备型和分析制备型三种。/离心机的组成(zǔchénɡ)及使用角式转头(zhuǎntóu)：离心管腔与转轴成一定倾角的转头(zhuǎntóu)。缺点：由于颗粒在沉降时先沿离心力方向撞向离心管，然后沿管壁滑向管底，因此(yīncǐ)管的一侧会出现颗粒沉积而产生“壁效应”，壁效应易使沉降颗粒受突然变速所产生的对流扰乱而影响分离效果。水平式转头：转头是由吊着的4或6个自由活动的离心套管构成。当转头转速达到(dádào)200～800rpm时，吊桶荡至水平位置，适用于密度梯度区带离心。优点：梯度物质可放在保持垂直的离心管中，离心时被分离的样品(yàngpǐn)带垂直于离心管纵轴，有利于离心结束后由管内分层取出已分离的各样品(yàngpǐn)带。缺点：颗粒沉降距离长，离心所需时间也长。垂直转头：其离心管是垂直放置，样品颗粒的沉降距离最短，离心所需时间(shíji