7半保留复制（1）定义：DNA在复制时,以亲代DNA的每一股作模板,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为DNA的半保留复制(semi-conservativereplication).AGGTACTGCCACTGG按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。不同生物体内DNA各不相同(大、小、线性、环状)，功能也不一样(保守、活跃)，反映在复制方式上就有差别。(1)线性DNA双链的复制(2)环状和多个起始点的双向复制。A.环状双链DNA及复制起始点B.复制中的两个复制叉C.复制接近终止点(termination,ter)dNTPDNA复制的酶学TheEnzymologyofDNAReplication参与DNA复制的物质酶和蛋白质因子在不连续合成中形成短的冈崎片段（Okazakifragment）的连接也是DNA聚合酶无法完成的。实际上，在复制叉处进行复杂的DNA复制过程中，需要许多相关的酶和蛋白因子参与。除DNA聚合酶外，还包括：①DNA旋转酶；②使DNA双股链在复制叉解开的解旋酶；③在DNA复制前防止解开的DNA单链局部退火的DNA结合蛋白；④合成RNA引物的酶；⑤除去RNA引物的酶；⑥使冈崎片段共价连接的DNA连接酶等重要的酶与蛋白因子。聚合反应的特点二、DNA聚合酶5´AGCTTCAGGATA3´|||||||||||（一）原核生物的DNA聚合酶（一）原核生物的DNA聚合酶原核生物中的三种DNA聚合酶（二）真核生物的DNA聚合酶（二）真核生物的DNA聚合酶1.遵守严格的碱基配对规律；2.聚合酶在复制延长时对碱基的选择功能；3.复制出错时DNA-pol的及时校读功能。5.1.4半不连续复制(semidiscontinuousreplication)复制的半不连续性前导链（leadingstrand）：DNA复制时，一股以3’→5’方向的母链作为模板，指导新合成的链以5’→3’方向连续合成的链称为前导链。（复制方向与解链方向一致）随从链（laggingstrand):DNA复制时，一股以5’→3’方向的母链作为模板，指导新合成的链沿5’→3’合成，1000-2000个核苷酸不连续的小片段的链称为随从链。（复制方向与解链方向相反)岗崎片段（Okazaki）：DNA复制时，一股以5’→3’方向的母链作为模板，指导新合成的链沿5’→3’合成1000-2000个核苷酸不连续的小片段称之为岗崎片段。岗崎片段由DNA连接酶连成一条完整的新链。半不连续复制：在DNA复制过程中，亲代DNA分子中以3’→5’向的母链作为模板指导新的链以5’→3’方向连续合成，另一股以5’→3’为方向的母链则指导新合成的链以5’→3’方向合成1000-2000个核苷酸长度的许多不连续的片段（岗崎片段），这种复制方式称之为半不连续复制。DNA连接酶DNA连接酶催化的条件是(1)需一段DNA片段具有3'-OH，而另一段DNA片段具有5'-Pi基；(2)未封闭的缺口位于双链DNA中，即其中有一条链是完整的；(3)需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由ATP供能。DNA连接酶连接切口DNA连接酶在复制中起最后接合缺口的作用。在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。也是基因工程的重要工具酶之一。5.1.6复制中的分子解链及DNA分子拓扑学变化（一）解螺旋酶、引物酶和单链DNA结合蛋白解螺旋酶(helicase)——利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链。引物酶(primase)——复制起始时催化生成RNA引物的酶。单链DNA结合蛋白(singlestrandedDNAbindingprotein,SSB)——在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。10解链过程中正超螺旋的形成拓扑异构酶作用特点既能水解、又能连接磷酸二酯键拓扑异构酶ⅠTopoisomeraseI（二）DNA旋转酶与DNA超螺旋的松驰DNA旋转酶引入超螺旋的分子模型Ⅰ：DNA双链以右手方向绕在四聚体的酶上；Ⅱ：DNA双链被切断，两个α亚基以其连接处为铰链转动，张开其靠近DNA断裂点的部分；Ⅲ：未断的DNA双链穿过切口；Ⅳ：连接断裂的DNA，以左手方向绕在酶分子上;Ⅴ：连接好的DNA释放出来。BindandcutDNA旋转酶每作用一次产生两个负超螺旋，因此可以消除复制叉向前移动所产生的正超螺旋，并且复制完的两个子代DNA双链的分离也需要DNA旋转酶的催化功能。当加入DNA旋转酶的抑制剂如香豆霉素(Coumermycin)，新生霉素(nov