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微生物遗传学和基因工程生物信息网站:美国国家生物信息中心www.ncbi.nlm.nih.gov生物谷:www.bioon.com重组DNA技术Avery等,1944HersheyandChasephageT21952Figure1JamesWatsonandFrancisCrickdiscoverthedoublehelicalstructureofDNA(Nature).半保留复制semi-conservative1958MeselsonandStahl.半不连续复制Replicationissemi-discontinuous冈崎片断Okazakifragments,连接酶(Ligase)dATP,dGTP,dCTP,dTTP,dUTP遗传物质DNA的基本特点:双螺旋碱基互补:A=T、GC方向性5’-ATGCGTAGCTAGAACCTCAG-3’3’-AGAC—5’DNA的复制半保留复制3’-ATGTAGCTAATG-5’DNA的转录模板链和编码链DNA转录时,双链中只有一条链被转录3’-AAGCGTATCGGATTC-5’(模板链)5’-TTCGCATAGCCTAAG-3’(编码链)转录5’-UUCGCAUAGCCUAAG-3’(RNA)转录由RNA聚合酶在DNA的特定区域起始,在特定部位结束RNA链的延伸:转录起始之后,RNA聚合酶按碱基互补原则(AU,TA,GT,CA)逐个合成RNA链DNA复制:引物、DNA聚合酶有关:DNA合成的重要概念1。半保留、半不连续2。引物3。方向:新链总是5’端向3’延伸5’-ATGATCGTACGTTACG-3’ATGC-5’5’-ATGTTAGCCGTAGCTGCTTCGATGCCATTCGGATCCG-3’3’-AUCGACGAAGCUAC-5’复制原点复制开始的地方,没有复制原点的DNA在细菌中不能复制。中心法则:几乎所有的生物都以同一种方式将储存在DNA序列中的遗传信息转变成蛋白质系列,称为中性法则12DNARNAProtein第一步:转录,遗传信息由DNA转录成RNA第二步:翻译,RNA序列决定蛋白质序列.转录(Transcription)1.RNApolymeraseDNARNAG-----CC-----GT-----AA---U2。模板链和编码链DNA转录时,双链中只有一条链被转录3’-AAGCGTATCGGATTC-5’(模板链)5’-TTCGCATAGCCTAAG-3’(编码链)转录5’-UUCGCAUAGCCUAAG-3’(RNA)3.启动子(Promoter)DNA链中RNApolymerase结合并开始转录的区域.同一种生物中启动子有相似的结构原核生物的启动子一般由两部分组成:1)-35box:常常由六个碱基组成:TTGACA,一般位于转录起始部位前35个碱基.2)-10box:位于转录起始位点前10个碱基,常常由6个碱基组成:TATAAT,在真核生物中DNA类似的区域常位于–25区,常称为TATAbox.强启动子:能高频率的启动转录的启动子,经常具有与上述介绍的几乎完全一致的-35and-10序列.弱启动子:常常有部分碱基被替代.Fig.ThesequenceofrrnBP1promoter3’-AGTCTTTTAATAAAATTTAAAGGAGAACAGTCCGGCCTTA5’-TCAGAAAATTATTTTAAATTTCCTCTTGTCAGGCCGGAATUPElement-35boxTTGAGGGATATTACGCGGTGGTGAATGCGTACTTGGCAT…-5’AACTCCCTATAATGCGCCACCACTTACGCATGAACCGTA…-3’-10boxtranscriptionACUUACGCAUGAACCGUA…mRNAInitiationoftranscription:RNApolymerasebindingtopromoter,thehelixunwind,transcriptionbegin.ElongationofRNA.Afterinitiation,RNAnucleotidesarelinkedtogethersimilartotheDNAprocess,formalonglineaRNAmolecule.GrowingofRNAmoleculeQuestion1.这是某一原核生物基因的末端的序列(模板链):5’-GTCAAGTTCCGTAAAAAACGGCGCAAGCCGCGCCGTGCGACATATAAAGCTTAATAGC-3’请指出其转录终止结构5’-GTCAAG