一、双特异性抗体制备双特异性抗体的方法主要有3种方法：它们分泌的是重链、轻链被杂化的抗体分子，有10种形式：重链、轻链都无改变，保持原特异性的配对抗体分子：LH-HL，KG-GK重链特异性相同的配对抗体分子：LH-HK，KH-HKKG-GL，LG-GL重链、轻链特异性不同的配对抗体分子：LH-GK，LH-GLKH-GL，KH-GK二、嵌合抗体三、人化抗体四、单链抗体五、免疫粘连素六、抗体基因文库的构建和基因表达筛选的表面呈现技术Ff丝状噬菌体成熟的gp8含有50个氨基酸，从构成外壳的功能来看可分为4个部分：（1）C端15个氨基酸偏碱性，与DNA相结合，构成外壳的内壁，在此处的突变将影响与DNA的相互作用。（2）25～35位肽段具有高度的疏水性，借此特性分子间相互聚合，形成固牢的外壳。这段肽链的改变将会影响噬菌体结构的稳定性。（3）从第6位的脯氨酸到C末端是连续的α螺旋结构，6～24位的螺旋肽段外露，在外壳上排列紧密，占据了噬菌体的大部分表面。如有稍大肽段插入，将会影响外壳的稳定性。（4）N端1～5位的氨基酸序列是丙氨酸-谷氨酸-甘氨酸-门冬氨酸-门冬氨酸（A-E-G-D-D），它外露于噬菌体表面，是外源肽段插入的最佳位置。在构建噬菌体呈现抗体文库技术中，主要有3个特点：（1）可用抗原制备出免疫吸附剂，将文库的噬菌体与其反应，再经洗涤、洗脱得以捕获和纯化，将这种表达所需的特异性抗体的噬菌体感染大肠杆菌而得到繁殖。如此经过亲和结合→洗涤→洗脱→繁殖的富集过程，称为“panning”（淘选），一轮paning便可富集1000倍。如此简便、高效率，是其他方法比似的。（3）这种方法不仅可以获得单链抗体，也可制备出重链、轻链结合的抗体（Fab）片段。外源基因编码的肽段在融合蛋白的N端，呈现在噬菌体表面时，C端锚着在膜上，N端是游离的，能够正确折叠，也可以形成二硫链。如果在插入基因与编码成熟gp8序列间放置amber终止码（TAG），则TAG就是蛋白质合成的终止信号，合成的多肽以非融合蛋白的形式分泌在内膜与细胞壁间的周质中，进而还能进入培养基中。利用这些特性，可将Fc蛋白锚着于细胞膜上，在周质中的分泌的轻链分子可与重链原位组装。形成完整的Fab片段积累在膜表面。