不同药用钩藤中总黄酮的含量变化测定不同药用钩藤中总黄酮的含量变化测定钩藤又叫大钩丁、双钩藤，为茜草科植物钩藤或华钩藤及其同属多种植物的带钩枝条;质硬，茎断面有黄白色髓部。下面是小编搜集的一篇关于药用钩藤总黄酮的含量变化研究的论文范文，欢迎阅读借鉴。药用钩藤有五个种，分布在贵州省内的主要是毛钩藤和钩藤居多，在临床上通常用于降血压。因黄酮类成分具有一定降压作用，本实验采用紫外—可见分光光度法，三氯化铝显色后于425nm波长处测定吸光度[1]，考察研究不同采收期、不同产地和不同种的药用钩藤中总黄酮的含量变化，为今后对钩藤的深入研究提供依据。1、材料与仪器紫外—可见分光光度计(岛津UV-2501PC);AE-240双量程电子分析天平，量程:万分之一和十万分之一两档(梅特勒-托利多上海有限公司);超声波清洗器;芦丁对照品(批号:100080-200707)，购于中国药品生物制品检定所;无水乙醇、三氯化铝均为分析纯，水为蒸馏水。药材样品采自贵州省开阳县翁昭村钩藤种植基地毛钩藤和贵州省剑河县钩藤种植基地钩藤，样品药材均为人工种植五年或五年以上。经贵阳中医学院讲师付志明、副教授魏升华鉴定为茜草科植物毛钩藤(UncariahirsuteHavil)，钩藤(Uncariarhyn-chophylla(Miq.)Miq.exHavil.)，药材样品在室内阴干经粉碎后于45℃烘至恒重并置于干燥器中备用。2、方法与结果2.1溶液的制备2.1.1对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品3.04mg，置于50ml量瓶中，加无水乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得浓度为60.80μg/ml的对照品溶液。2.1.2三氯化铝溶液的`制备精密称取三氯化铝12.0717g，置于500ml量瓶中，加无水乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，得浓度为0.10mol/L的三氯化铝溶液，备用。2.1.3供试品溶液的制备取钩藤粉末1g，精密称定，置于50ml具塞的锥形瓶中，精密加入无水乙醇20ml，称定重量，超声(功率为60%)提取30min，取出，放冷，用提取液补足减失的重量，过滤，精密量取续滤液2ml，置10ml容量瓶中，精密加入浓度为0.10mol/L的三氯化铝溶液1ml，混匀，加无水乙醇至刻度，摇匀，静置15min，即得供试品溶液。2.2检测波长的确定取供试品溶液和对照品溶液，按2.1.3“供试品溶液的制备”项，从“精密加入浓度为0.10mol/L的三氯化铝溶液1ml”起同法操作，进行显色，且同法作试剂空白，用紫外—可见分光光度计进行扫描，分别根据其光谱图知:样品及对照品在425nm处均有最大吸收峰，故本实验选择425nm作为钩藤总黄酮的测定波长。2.3线性关系考察精密吸取浓度为60.80μg/ml的芦丁对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0ml，分别置于7个10ml的容量瓶中，各精密加入浓度为0.10mol/L三氯化铝溶液1ml，并加无水乙醇至刻度，摇匀，静置15min，同法作试剂空白，用紫外—可见分光光度计在425nm的波长处测定吸光度，以对照品的浓度(μg/ml)为横坐标(X)，吸光度为纵坐标(Y)进行回归计算，得到总黄酮的回归方程为:Y=0.0392X+0.0104，r=0.9998。结果表明总黄酮在3.04～24.32μg/ml的范围内线性关系良好。2.4精密度试验精密吸取浓度为60.80μg/ml的芦丁对照品溶液2ml，按2.1.3“供试品溶液的制备”项，从“精密加入浓度为0.10mol/L的三氯化铝溶液1ml”起同法操作，显色后，分别进行吸光度测定，以6次测得的吸光度计算RSD为2.59%，表明仪器精密度良好。2.5稳定性试验精密吸取按“2.1.3”项下制备的供试品溶液，分别在0、30、45、60、75、90min进行吸光度测定，以测得的吸光度计算RSD为2.98%，表明供试品溶液在90min内稳定性良好。2.6重复性试验取6份2012年3月采收开阳翁昭人工种植毛钩藤样品粉末，每份1g，精密称定，分别置于6个50ml具塞锥形瓶中，按“2.1.3”项下“供试品溶液的制备”方法制备供试液，同法作试剂空白，用紫外—可见分光光度计在425nm处测定吸光度，计算出该钩藤药材中总黄酮(按芦丁计)的平均含量为0.08%，RSD为2.95%。2.7加样回收率试验称取已知总黄酮(按芦丁计)的平均含量为0.08%的钩藤粉末6份，每份0.5g，精密称定，分别置于50ml具塞锥形瓶中，每份分别精密加入浓度为20.00μg/ml的芦丁对照品溶液20.0ml，按“2.1.3”项下“供试品溶液的制备”方法制备供试液，同法作试剂空白，用紫外—可见分光光度计在425nm处测定吸光度，计算出总黄酮的平均回收率为100.75%，RSD为2.94%，表明本法能够准确的测定中药钩藤中总