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动物实验基本操作一(固定、性别判定、标识)实验目(de)在做动物试验时,为确保给药、实验顺利进行,防止被动物咬伤、准确辨别动物性别、准确标识动物,要学会用正确方法捉拿实验动物、掌握辨别动物性别(de)方法以及掌握标识动物(de)方法.实验对象SD大鼠,KM小鼠,雌雄各半,体重180-250g.实验器材和药品器材:鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套药品:苦味酸80%~90%酒精饱和溶液、20%乌拉坦实验步骤一、小鼠(de)捉拿1、徒手固定:用右手提起尾巴中部,放在鼠笼盖或其他粗糙面上.向后上方轻拉,此时,小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面.左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤,再置小鼠于左手心,并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤,无名指压住小鼠尾根部,将其固定于手中.右手可行注射或其它操作.2、固定器固定:尾静脉注射或给药时,将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当(de)容器(如烧杯),只露出尾巴,该类容器能够压住尾部,避免其活动.勿固定过紧造成窒息死亡.进行腹腔手术或心脏采血时,先准备一个15-20cm(de)方木板,边缘钉入五颗钉子.将小鼠四肢分别用20-30cm(de)线绳捆绑,线(de)另一头分别绑在方木板(de)钉子上,并且在头部上颚切齿牵引一根线绳,也固定在钉子上,达到完全固定.二、大鼠(de)捉拿4-5周内(de)大鼠,方法同小鼠.周龄较大(de),则:1、首先戴好防护手套.2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起,放在大鼠饲养盒(de)面罩上.3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部,稍加压力向头颈部滑行.4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部(de)头颈皮肤,其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤,完成抓取保定.三、性别判定小鼠、大鼠性别判定(1)幼鼠外生殖器与肛门间隔短(de)是♀,外生殖器与肛门间隔长(de)是♂.(2)成年动物可直接肉眼辨认,雄性有膨起(de)阴囊和阴茎,雌性动物有阴道口.四、动物(de)标记小鼠(de)短期标记法:苦味酸80%~90%酒精饱和溶液(黄色),标出属于自己(de)编号注意事项1、实验人员要有精神准备:掌握方法,胆大心细,做好防护.2、动物兴奋(de)时候不要抓取,待其安静下来.3、根据受试动物(de)给药部位或采血方法(de)不同,事先选择徒手固定还是固定器固定.4、固定时把握好力度,过分用力会使小鼠颈椎脱臼或窒息死亡,若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者(de)手.思考题1.在固定实验动物时如何才能快、准、稳动物实验基本操作二(给药途径、采血)实验目(de)在做动物试验时,为确保给药、采血实验顺利进行,要掌握根据不同(de)情况进行动物给药以及采血(de)正确方法.实验对象SD大鼠(180-250g),KM小鼠(18-22g),雌雄各半.实验器材和药品器材:鼠笼、大小鼠固定器、方木板、长钉、细绳、防护手套,灌胃针,注射器(1ml,5ml)、棉球,剪毛剪、手术剪、手术刀、采血管、弯头镊子药品:生理盐水、75%酒精棉球,一次性采血管,一次性EP管实验步骤一、给药途径1、大、小鼠(de)灌胃法用左手固定鼠,右手持灌胃器(安好灌胃针并已吸好药物),将灌胃针从鼠(de)嘴角插入口腔,压迫鼠(de)头部,使口腔和食管成一直线,轻轻转动针头刺激鼠(de)吞咽,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食管,如果动物挣扎厉害,退出灌胃针,待动物安静下来,重新插入.灌胃针前端达到膈肌水平,即可慢慢推灌药液,如很通畅,则说明已进入胃内.如不通畅,且动物挣扎厉害,须拔出重新操作.2、皮下注射左手拇指和食指轻轻提起动物皮肤,右手持注射器,将注射针刺入皮下,若针头容易摆动则证明针头已在皮下,推送药液,缓慢拔出注射针,稍微用手指压片刻针刺部位,以防药物外漏.3、肌肉注射选用肌肉发达,无大血管经过(de)部位,如臀部或股部.(肌肉注射比皮下和腹腔注射用得较少,但当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中(de)药物时,常采用肌肉注射)4、腹腔注射A、左手抓取并固定好动物,将腹部朝上.B、右手持注射器将针头在下腹部腹白线稍左或偏右(de)位置,从下腹部朝头方向几乎平行地刺入皮下,进针3-5mm.C、再使针头与皮肤呈45°角斜穿过腹肌,当针尖穿过腹肌进入腹腔时,有落空感,然后固定针头,保持针尖不动,回抽,无回血,无肠液、尿液,便可缓缓推入药液.5、静脉注射(尾静脉注射)A、大、小鼠尾静脉共有3根(左、中、右),一般常选用两侧(de)静脉.注射前,先把动物固定在暴露尾部(de)鼠尾固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替).B、拔去尾部静脉走向(de)毛,用75%酒精棉球反复擦拭鼠