实验动物的基本操作.doc
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1生理教研室:贺丹2005-10-52新乡医学院理论课教案首页课程名称:机能学实验授课教师姓名及职称:贺丹助教一、题目实验动物的基本操作二、对象2005级本科临床各专业三、单元教学目标与课时分配1.理论讲解+试教1学时2.学生实验操作4学时四、授课重点1.分离血管、神经2.家兔颈总动脉插管五、授课难点器械的使用方法六、授课形式小班授课七、授课方法与课前准备1.做好预实验2.认真备课、示教3.启发教学+讨论八、教材与参考文献1.《生理学》第六版姚泰主编2.《药理学》第五版金有豫主编3.《医学机能学实验》第二版刘巨源主编4.《生理学实验方法》李东亮主编九、思考题1.为何气管插管时斜面向下,插入气管后翻转180o后再固定?十、教研室审查意见主任签字新乡医学院生理学与神经生物学教研室2006年10月05日3动物实验的基本操作一、机能学实验的概述:器官组织水平的动物实验方法主要分为急性和慢性两大类。急性实验法又可分为离体组织器官法和活体解剖法。如离体蛙心灌流即是离体组织器官法,如胃肠运动的直接观察即是活体解剖法。急性生理实验持续时间短暂,条件简单、容易排除其他因素干扰,并有可能对研究的对象进行直接的观察和细致的分析。动物实验后一般不能存活,也无须无菌条件。但所获得的结果可能与正常生理机能相差较大,不能轻易推断。慢性生理实验通常先实施慢性生理手术,在无菌条件下安置体内电极、安装瘘管或切除移植腺体等,待动物术后恢复时,再在机体清醒完整的情况下进行记录、取样等实验项目。这类实验过程较长,实验室条件也要求较高,实验动物模型也可使用较长时间,其机能活动更接近正常。每种方法都有它的长处,也都存在—定的局限性,要了解并选择适当的方法,以与一定的研究目的和实验对象相适应。二、实验动物与实验用动物:实验动物是根据科学研究的需要,定向培育而成的,供科学实验需要的对象和材料。它必须有明确的生物学特征和清楚的遗传背景,并经微生物控制和特定环境下驯化培育。实验用动物通常指用于实验的各种动物,它包括实验动物、家禽(畜)和野生动物。其中一些实验用动物可能出于某些受试动物敏感性或操作技术上的需要,但现阶段尚不可能完全达到实验动物的实验要求。三、常用器械的使用方法:1.粗剪刀、组织剪、眼科剪2.镊子3.玻璃分针四、实验动物基本操作――家兔1.抓取:右手抓住其颈部皮肤,轻轻提起,左手迅速托拄其臀部2.兔耳缘静脉麻醉耳缘静脉位于耳背面外侧缘,拔去兔毛(用手轻弹,或用水湿润局部),使静脉血管充盈、扩张,便于穿刺进针。左手拇指和无名指固定兔耳远端,食指和中指捏住近心端,右手持注射器,以15?~20?角刺入血管(尽量从远心端开始),当回抽有血或阻力小时,可推进注射器。注意:麻醉速度、剂量(氨基甲酸乙酯1g/kg)、随时检查深浅反射。3.固定:四肢夹于兔台四个兔夹上,细线挂其门牙固定头部。4.颈部手术操作4⑴剪毛:粗剪刀压着皮肤,逆毛发生长放向剪,兔毛放置于盛水的兔毛缸内,剪毛区要大于手术区。⑵暴露气管:手扪及甲状软骨,用剪刀切开皮肤约6~7cm长(上起甲状软骨,下达胸骨上缘)。切开皮下,钝性分离肌肉,注意避开血管,以免造成大出血。⑶气管插管:气管充分暴露后,穿线备用,在甲状软骨下第3、4环状软骨之间做一横形切口(1/3-1/2气管周长),再向上做一纵形切口,使成倒“T”字形。气管插管斜面向下,从切口处向肺脏方向插入,用棉线结扎固定,并用线的残端扎于气管插管分叉处,以防脱落。⑷分离血管、神经左手食指及拇指捏住切口一侧皮肤,其余三指用力向上顶,在气管两侧暴露血管神经鞘。血管神经鞘内有:颈总动脉迷走神经:最粗大、银白色,位于外侧。交感神经:稍细,位于内侧。减压神经:最细,位于两者之间。⑸动脉插管(用于测量血压、放血等)a.分离足够长的颈总动脉(2-3cm),穿两根线备用。b.全身血液肝素化0.3%1ml/kg体重。c.结扎远心端,尽量靠头端。d.用动脉夹夹闭近心端,尽量靠心脏端(结扎线距动脉夹应有2cm)。e.用眼科剪在尽可能靠近结扎线处,剪1/3-1/2血管周长的切口。f.将充满抗凝剂(枸橼酸钠)的动脉插管插向心脏,在血管上结扎插管,并用线的残端结扎血管外动脉插管。g.