Ikaros家族蛋白异源表达、纯化及初步晶体学研究的任务书任务书任务名称：Ikaros家族蛋白异源表达、纯化及初步晶体学研究任务目的：本任务旨在实现Ikaros家族蛋白异源表达、纯化以及初步晶体学研究，为后续的生物学研究打下基础。任务要求：1.确认Ikaros家族蛋白的序列信息及结构特点，确定需要表达的蛋白亚型，并优化表达条件。2.构建合适的表达载体，将目标基因插入到载体中。3.选定合适的宿主细胞，进行转染，实现目标蛋白的异源表达。4.采用不同的纯化方法，如亲和纯化、透析、柱层析等，纯化目标蛋白。5.确定纯化后的蛋白的纯度和活性，并进行初步晶体学研究。6.实验过程中需要注意安全，遵循实验室规章制度。7.完成实验后需整理实验记录并进行数据分析，撰写实验报告。8.时间安排为4周。任务分工：1.确定Ikaros家族蛋白的序列信息及结构特点，确定需要表达的蛋白亚型，并优化表达条件。负责人：李XX任务内容：根据资料检索及相关数据库，确定Ikaros家族蛋白的序列信息及结构特点，并根据研究需要确定需要表达的蛋白亚型，进行表达条件的优化。2.构建合适的表达载体，将目标基因插入到载体中。负责人：张XX任务内容：根据确定的表达条件，选择适合的表达载体，并使用PCR等技术将目标基因插入到载体中，构建合适的表达载体。3.选定合适的宿主细胞，进行转染，实现目标蛋白的异源表达。负责人：王XX任务内容：根据确定的表达条件和表达载体，在多种宿主细胞中进行转染并筛选合适的宿主细胞，实现目标蛋白的异源表达。4.采用不同的纯化方法，如亲和纯化、透析、柱层析等，纯化目标蛋白。负责人：赵XX任务内容：根据目标蛋白的特性，选择合适的纯化方法，如亲和纯化、透析、柱层析等，对目标蛋白进行纯化。5.确定纯化后的蛋白的纯度和活性，并进行初步晶体学研究。负责人：刘XX任务内容：确定纯化后的蛋白的纯度和活性，并进行初步晶体学研究，为后续的晶体结构分析打下基础。6.报告撰写和整理实验记录。负责人：全体组员任务内容：全体组员共同撰写实验报告，整理实验记录并进行数据分析。任务进度安排：第一周：确定表达条件并构建表达载体。第二周：进行转染和纯化实验，筛选合适的宿主细胞和纯化方法。第三周：确定纯化后的蛋白的纯度和活性，进行晶体学研究。第四周：整理实验记录并进行数据分析，撰写实验报告。参考文献：1.KimJI,KoHJ,LiJY,etal.ComprehensiveanalysisofDNAbindingpropertiesoftheHoxproteinlox[J].PLoSOne,2017,12(4):e0175463.2.EscobarTM,KanellopoulouC,KuglerDG,etal.miR-155activatescytokinegeneexpressioninTh17cellsbyregulatingtheDNA-bindingproteinJarid2torelievepolycomb-mediatedrepression[J].Immunity,2014,40(6):865-879.3.TreiberN,TreiberT,ZocherG,etal.AcompendiumofRNA-bindingproteinsthatregulatemicroRNAbiogenesis[J].MolCell,2019,75(4):696-711.4.Peruzzotti-JamettiL,BernstockJD,WillisCM,etal.Neuralstemcellstrafficfunctionalmitochondriaviaextracellularvesicles[J].PLoSBiol,2020,18(10):e3000855.