分子生物学-1.ppt
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PCR技术在动、植物细胞中,细胞核含有DNA和RNA、细胞质中如线粒体和叶绿体含有少量的DNA和RNA,核糖体只含有RNA。细菌中,在细胞核和细胞质均含有DNA和RNA。病毒有DNA病毒和RNA病毒。至今为止还没发现既含DNA也含RNA的病毒。RNA主要有mRNA、tRNA和rRNA,它们的主要作用是蛋白质合成的直接模板、氨基酸的运载体、核糖体的组成成分。此外在病毒中RNA还起到遗传物质的作用。DNA主要起到遗传物质的作用。传统酚-氯仿法抽提DNA核酸纯化所用试剂盒DNA提取试剂盒RNA提取试剂盒二PCR技术反应体系与反应条件:10×扩增缓冲液10ul4种dNTP混合物引物模板DNATaqDNA聚合酶Mg2+加双或三蒸水标准的PCR过程分为三步:1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。2.退火(复性)(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。DNA聚合酶;PCRMix;RT-PCR反转录试剂盒,荧光定量PCR试剂盒。三凝胶电泳各种DNAmarker。