二、trp衰减子的作用机制（一）trpmRNA的前导序列的结构（图8－23）（二）衰减子的作用机制1，trpmRNA前导序列的二级结构（图8－24）2，trpmRNA前导序列转录与翻译的时空关系3，Trp对衰减子作用的影响（图8－25）（1）Trp存在时（图8－25，a）（2）Trp（或Arg）饥饿时（图8－25，b）（3）其他Aa（如Gly）饥饿时（图8－25，c）4，Trp衰减子模型的实验证据三、衰减子的普遍性及其生物学意义1，普遍性（1）结构共性（2）作用机制共性2，衰减子的作用机制可被看作是一种可阻遏的正调控3，衰减子调控的生物学意义（1）调控更为灵敏（2）对代谢产物的反应更为直接（3）调控更为精细四、负责核苷酸合成的基因的衰减子（一）天门冬氨酸转氨甲酰酶操纵元（pyrBI操纵元）前导序列结构（二）pyrBI操纵元衰减子作用的机制（图8－26）1，UTP含量较低时2，UTP充足时第七节翻译水平的调控3，反义RNA的作用方式（1）与mRNA的核糖体结合位点结合，使翻译不能起始（2）与mRNA结合形成双链结构，成为核酸内切酶的底物，从而使mRNA不稳定（3）与转录物结合，使转录提前终止（二）大肠杆菌外膜蛋白基因表达中micRNA的作用1，渗透压对ompC，ompF基因表达的影响2，micFRNA对ompF基因表达的调控（三）λ噬菌体CⅡ蛋白对晚期基因表达调控的机制1，PaQ及其转录产物2，PaQ对Q基因表达的调控（1）抑制Q基因mRNA的翻译（2）由于PaQ的转录活性很高，可以抑制PR的转录，使Q基因的mRNA转录减少（3）PaQ的作用的证据（四）反义RNA的应用1，研究应用2，临床应用二、mRNA二级结构对基因表达的影响（一）mRNA二级结构对自身翻译的影响1，单链噬菌体MS2家族噬菌体基因的表达产物（图8-29）（1）A基因：编码附着蛋白（2）CP基因：编码衣壳蛋白（3）rep基因：编码复制酶（4）溶菌基因：裂解蛋白2，R17噬菌体mRNA二级结构对翻译的影响（1）R17正链RNA的特点（2）基因的翻译的过程（3）R17正链RNA复制过程中的二级结构对翻译的影响A，R17正链RNA的复制B，R17正链RNA的复制时A基因的翻译（图8-30）（二）mRNA二级结构对自身寿命的影响1，影响mRNA降解速度的因素（1）mRNA降解不是内切酶随机切割的结果（2）核糖体对mRNA寿命无重要影响（3）mRNA末端二级结构的作用2，mRNA中二级结构对int基因寿命的影响（1）溶菌周期的int基因表达产物N蛋白的作用使RNA聚合酶转录出含int基因的产物L2L2转录产物的结构（图8-31）sib位点返回调控（2）溶原周期的int基因表达（3）从溶原生长向溶菌生长转变时int基因的表达3，S12-引发酶-σ亚基操纵元mRNA二级结构对基因寿命的影响（图8-18）（1）S12-引发酶-σ亚基操纵元结构（P304）转录产物的降解：先由RNA内切酶在引发酶和σ亚基之间切断，然后由外切酶从3‘末端发生降解（2）引发酶部分mRNA的降解降解最快（3）S21基因和σ亚基编码区的mRNA的降解均有发夹结构，较稳定S21基因的mRNA还具衰减子结构，更为稳定三、蛋白质合成的自体调控控制自身mRNA的可翻译性的蛋白质：多数为核酸结合蛋白质，或是与核酸相互作用的蛋白质1，RF2对自身mRNA翻译的控制（1）RF2mRNA结构编码340个Aa有两个ORF：ORF0（编码25个Aa，终止密码UGA）和ORF1（编码315个Aa，终止密码UAA）（2）RF2mRNA的翻译RF2充足时：核糖体翻译完ORF1在UGA处肽链合成终止RF2缺乏时：核糖体到达UGA时不能释放，发生一个碱基的移框，继续合成下游的315个Aa。RF1促进核糖体在UAA的释放(3)移框窗口必需保留15个核苷酸，才能保证30%以上的移框效率窗口内部S－D序列对移框有重要作用2，核糖体蛋白质合成的自体调控（1）Ecoli基因表达机构的蛋白质及其基因的操纵元A，蛋白质种类有70余种：核糖体蛋白质（50多种），辅助蛋白质，RNA聚合酶的亚基和辅因子B，操纵元数目：六个C，操纵元中不同基因表达的差异性核糖体蛋白质：绝大多数一个核糖体一个（L7／L12有4个）EF－Tu：每个细胞中是核糖体数的10倍RNA聚合酶的亚基：比核糖体少（2）核糖体蛋白质合成的自体调控A，有自体调控作用的核糖体蛋白的特点在核糖体中直接与rRNA结合能与rRNA的结合（亲和力较高），也可与mRNA结合（亲和力较低），两种结合序列有很大的同源性，并有相似的二级结构B，核糖体蛋白质合成的自