甾体激素类药物的分析氢化可的松、醋酸地塞米松、地塞米松磷酸钠、曲安奈德、甲睾酮、丙酸睾酮、苯丙酸诺龙、黄体酮、醋酸甲地孕酮、米非司酮、雌二醇、炔雌醇、炔诺酮和炔诺孕酮等甾体激素类药物的基本结构与分类、鉴别试验和含量测定。第一节基本结构与分类一、母核环上双键的表示方法：用“”表示,双键的位置写在的右上角。双键位置甾环构型􀂃β位取代􀂃α位取代二、分类按生理作用分为：1．肾上腺皮质激素代表药物有：人工合成药物：结构特点：ⅰ．含有21个Cⅱ．A环：4-3-酮结构（,-不饱和酮）ⅲ．17位：醇酮基，有还原性。供分析官能团：ⅰ．A环的4-3-酮ⅱ．17位的醇酮基ⅲ．17、21-二羟基-20-酮11位羟基或羰基受立体效应影响,无利用价值。2．雄性激素及蛋白同化激素代表药物：蛋白同化激素在睾丸素基础上结构修饰得到，如结构特点：ⅰ．含有19个Cⅱ．A环的4-3-酮ⅲ．17位羟基、甲基、酯3．孕激素安宫黄体酮结构特点：ⅰ．含有21个Cⅱ．A环的4-3-酮ⅲ．17位甲酮基4．雌激素结构特点：ⅰ．含有18个Cⅱ．A环：苯环，3位上有酚羟基，10位无甲基ⅲ．17位：羟基、乙炔基口服避孕药小结第二节鉴别试验与硫酸显色反应Kober反应：指雌激素与硫酸—乙醇共热呈色，用水或稀硫酸稀释后，重新加热发生颜色改变，并在515nm附近有最大吸收的反应。（特征反应）2．官能团①C17-醇酮基:肾上腺皮质激素类药物特征反应。机理：C17-醇酮基有强还原性，与氧化剂作用，被氧化成水合醛。②羰基3位,20位羰基可与羰基试剂反应羰基试剂:羟胺、2,4-二硝基苯肼、异烟肼、氨基脲、苯肼等③甲酮基--孕激素特征反应第17位的甲酮基和亚硝基铁氰化钠作用,形成蓝紫色的络合物。④乙炔基有机氟香△代表药物有：黄体酮雌二醇甲睾酮三、薄层色谱法TLC法3300～3000cm-1醋酸可的松醋酸酯,C20–酮,C11–酮基,△4–3–酮基结构特征：酚羟基、C17–OHC17–乙炔基一、有关物质硒三、有机溶剂残留量(甲醇和丙酮)气相色谱法。四、游离磷酸原理：第四节含量测定2．讨论①前提是原料药中“其它甾体”必须合格，否则，不适用。需进行分离后再测定。如炔孕酮测定制剂时，赋形剂在240nm附近有吸收需经前处理后测定。如醋酸地塞米松片,氢化可的松片和注射液,醋酸可的松片和注射液,醋酸泼尼松片,甲睾酮片,醋酸甲地孕酮片,炔雌醇片,炔诺酮片。习题：醋酸氢化可的松滴眼液的含量测定方法如下：取本品，摇匀，精密量取2ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置另一100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在241nm波长处测得吸收度A=0.408，求醋酸氢化可的松的标示百分含量。已知：醋酸氢化可的松的吸收系数E1%1cm=395；本品规格为3ml∶15mg.(103.3%)二.四氮唑比色法1．四氮唑盐的种类：（1）红四氮唑：2,3,5—三苯基氯化四氮唑2,3,5—triphenyltetrazoliumchloride）缩写TTC或RT（Redtetrazolium）还原产物为不溶于水的深红色三苯甲（2）蓝四氮唑：3,3’—二甲氧苯基—双—4，4’—（3,5—二苯基）氯化四氮唑{3,3-dianisole-bis[4,4’-(3,5-diphenyl)triphenyltetrazoliumchloride]}缩写BT(Bluetetrazolium)，还原产物为暗兰色的双甲，2．原理17位-醇酮基具有还原性，在碱性条件下能将四氮唑盐定量地为有色的甲，在一定波长下具有最大吸收，可用比色法进行含量测定3、测定法A．TTC法:BP;Ch.PB．BT法:USP4、讨论4、讨论bC21：α-羟基（C21-OH）①21-OH酯化后，较母体羟基反应速度慢即：游离体>酯类如：可的松>醋酸可的松②简单酯>复杂酯，醋酸酯>磷酸酯>琥珀酸酯>三甲基醋酸酯（2）溶剂和水分的影响：a常用无水乙醇含水量≯5%，对结果无影响含水量为10%，吸收度约降低10%含水量为30%，反应完全受到抑制b用无醛醇醇中不能含有醛类—醛有还原性，使吸收度↑（3）试剂质量及加入顺序a.灵敏度：BT>TTC；BT：淡黄色，空白值高，稳定性差；TTC：无色，空白值较低，稳定性好.▲USP规定：BT：极淡黄色，空白A值与乙醇比较≯0.03~0.06b.加入顺序：先加TTC或BT，后加(CH3)4N+OH-原因：醇酮基与(CH3)4N+OH-长时间接触，有部分分解。Ch.P:氢化可的松软膏,醋酸地塞米松注射液,醋酸可的松眼膏,醋酸泼尼松眼膏,醋酸泼尼松龙注射液（4）氧及光