人突变CD59蛋白的提取纯化与单克隆抗体的制备的任务书.docx
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人突变CD59蛋白的提取纯化与单克隆抗体的制备的任务书任务名称:人突变CD59蛋白的提取纯化与单克隆抗体的制备任务背景:CD59蛋白是一种调节细胞膜攻击复合物(MAC)形成的重要蛋白质。在正常情况下,CD59蛋白可对MAC的形成起到阻碍作用。但是,CD59基因的突变可能导致该蛋白质的异常表达,从而引发多种疾病,如血型不相容性输血反应等。本任务旨在提取突变的CD59蛋白,并制备其单克隆抗体。任务要求:1.提取突变的CD59蛋白:(1)选择适当的样品,建立CD59蛋白提取体系;(2)通过色谱纯化等方法获得突变CD59蛋白。2.制备突变CD59蛋白的单克隆抗体:(1)免疫小鼠或兔子,获得具有高亲和力的单克隆抗体;(2)通过Westernblot等方法鉴定抗体的特异性和亲和力。任务进度安排:第一周:文献资料收集及阅读,建立CD59蛋白提取体系。第二周:样品采集,优化CD59蛋白提取体系,开始纯化CD59蛋白。第三周:继续纯化CD59蛋白,进行抗原制备和小鼠免疫。第四周:小鼠免疫结束,开始获得抗体,筛选单克隆抗体。第五周:制备和纯化单克隆抗体,测定亲和力。第六周:实验结果分析,撰写实验报告和研究论文。任务所需仪器设备及试剂:搅拌器、离心机、超声波处理器、振荡器、pH计、酶标仪、分子筛柱、离子交换柱、亲和柱;蛋白质电泳仪、Westernblot试剂盒、CD59蛋白质标准品、抗CD59的一抗和二抗、小鼠或兔子等。
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