三、有害元素的测定（一）铅的测定1、双硫腙比色法①原理：样品经消化后，在pH=8～9时Pb2++双硫腙→红色螯合物，可被三氯甲烷、四氯化碳等有机溶剂萃取，加入盐酸羟胺、氰化钾、柠檬酸铵，可防止Fe、Cu、Zn等干扰，比较颜色深浅可测Pb浓度②测定吸取10μg/mlPb标准溶液00.10.20.30.40.5ml分液漏斗中，加入1％HNO320ml加入柠檬酸铵/盐酸羟胺/氰化钾/三氯甲烷于λ=510nm测A同样测待测液，绘制标准溶液2、原子吸收分光光度法（259-262）四、黄曲霉毒素AFTB1的测定（P236-239)（一）方法原理（薄层色谱法）经有机溶剂提取、净化、浓缩，经薄层色谱分离，在365nm紫外光下产生蓝紫色荧光，据薄层板上显示荧光的最低检出量测定黄曲霉毒素B1的含量。（二）样品预处理1、提取：根据性质，可选用甲醇、氯仿为溶剂。油脂高的需用己烷、石油醚脱除。用甲醇：水=55：45萃取（AFTB1易与蛋白质大分子包围）AFTB12、净化：用乙醚、己烷去油脂、色素、用甲醇、氯仿洗下AFT,采用液—液分配萃取法3、浓缩：蒸发皿中挥干后再溶解,溶解液为苯—乙腈液（三）样品测定1、薄层板的制备选择吸附剂（硅胶G）加水成糊，涂布薄层2、点样（P238)3、展开4、观察5、验证试验6、定量（四）计算(239)XB1=(0.0004×1000)/[(V1×w)/V2]食品分析方法的建立食品分析方法的建立主要从两个方面考虑1、样品处理是食品分析的前提应根据不同样品采用不同方法进行样品处理，采取的措施：分离、掩蔽A.待测组分的性质如黄曲霉毒素AFTB1,难溶于水、己烷、戊烷、石油醚、乙醚易溶于氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、油对光、热、酸稳定,对碱、氧化剂不稳定,在365nm紫外光照射下（激发λ=425nm）B.被测食品样品的特征根据不同食品样品的不同特征，采取相应的样品处理方法;提取：根据性质，可选用甲醇、氯仿为溶剂。油脂高的需用己烷、石油醚脱除。用甲醇：水=55：45萃取（AFTB1易与蛋白质大分子包围）AFTB1净化：用乙醚、己烷去油脂、色素、用甲醇、氯仿洗下AFT,采用液—液分配法,色谱柱分离浓缩：蒸发皿中挥干后再溶解,溶解液为苯—乙腈液2、选择适宜的测定方法①建立测定方法的依据根据待测组分的性质特点及要求进行选择②建立分析方法的原理及技术A.分离方法、分析方法的确定一般采用提取、净化、浓缩步骤如：AFTB1可采用荧光分光光度法进行测定。激发λ=365nm，发射λ425nm可采用薄层色谱法进行定性、定量分析。关键是选择良好的吸附剂（硅胶G）和适宜的展开剂（乙醚、丙酮+氯仿）B.进样量的确定稀释定量：样液中AFTB1荧光点强度与AFTB1标准点最低检出量（0.0004μg）的荧光强度一致（5μg/Kg）若不一致，再稀释至一致为止。C.论证所用方法的可靠性通常采用测定回收率方法。还可与仲裁方法（或标准方法）比较。（如不溶性膳食纤维测定）思考题：1、简述有机氯农药残留量的测定方法。2、简述有机磷农药残留量的测定方法。3、简述有害元素的测定方法。4、简述铅的测定方法。5、简述黄曲霉毒素AFTB1的测定方法。思考题：1、简述有机氯农药残留量的测定方法。2、简述有机磷农药残留量的测定方法。3、简述有害元素的测定方法。4、简述铅的测定方法。5、简述黄曲霉毒素AFTB1的测定方法。