生物制药工艺学中亲和层析学习PPT教案.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPTX 页数:23 大小:213KB 金币:10 举报 版权申诉
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生物制药工艺学BiopharmaceticalTechnology二:亲和层析有如下特点:(CharacteristicsofAffinityChromatography)亲和层析载体的性质与选择六:常用的亲和层析载体:(VectorsofAffinityChromatography)1:纤维素(cellulose)2:葡聚糖凝胶(Sephadex)3:琼脂糖凝胶(Sepharose)4:聚丙烯酰胺凝胶(Bio-gelP)5:多孔玻璃珠(Bio-Glass)6:其它新型载体(Othergels)七:亲和层析配基的选择(Selectionofligand)1.纯化对象和配基之间必须有较强的亲和力.2.但亲和力太高也是有害的,因为在解离配基复合物时所需的条件就要强烈,这样可能使生物分子变性。3.配基必须具有适当的化学基团,可用于和载体相连,同时又不影响配基与生物分子之间的亲和力。亲和层析配基的性质与选择第二节:载体、配基、目的物的连接:(Conjunctionofvector、ligandandtargetmaterial)Fig3.ACreliesuponareversiblehighlyspecificbindingreaction.Fig4.SpacerarmprincipleFig5.PrincipleofpreparingACmedia第三节:亲和层析的基本操作方法:2.样品上柱和冲洗:(Sampleapplicationandwash)样品中的目的物与层析介质选择性的吸附,杂质不被吸附。用上样Buffer冲洗柱体,杂质被冲洗下来。形成杂质峰(见下图)。3.洗脱(Elution)选择适当的条件,将吸附在亲和介质上的目的物解吸下来(见下图)。Fig4.Spacerarmprinciple2.样品上柱和冲洗:(Sampleapplicationandwash)样品中的目的物与层析介质选择性的吸附,杂质不被吸附。用上样Buffer冲洗柱体,杂质被冲洗下来。形成杂质峰(见下图)。