红豆杉（Taxus）红豆杉种类：全世界11种（北半球）。我国4种一变种：东北红豆杉、（中国）红豆杉、云南红豆杉、喜马拉雅红豆杉（西藏红豆杉）、南方红豆杉（中国红豆杉的变种紫杉醇含量：干树皮重0.01%（万分之一）数量：稀少，散生、不成林生长：极为缓慢，50-70年成树云南红豆杉——对细胞系进行持续选择：细胞系在培养工程中，细胞系会出现变异，通过持续选择，有可能不断提高细胞系的生产能力。大量的试验证实了这一点。云南红豆杉细胞系统选择的结果植物种类SinenxanA：R=AcSinenxanB：R=CH3CH2COSinenxanC：R=CH3CH2CH(CH3)CO——细胞诱变选择细胞系：如Deus用X射线处理长春花细胞，获得了蛇根碱含量达2%的细胞系；Berlin等用化学诱变烟草细胞，获得了生产肉桂酰腐胺能力提高了10倍的细胞系。——细胞系遗传改良：利用基因工程技术超量表达限速酶基因、阻断分支代谢基因表达，从而提高细胞系合成次生代谢产物能力。代谢工程（2）优化培养基（次生代谢物的产量=细胞生长量×细胞合成代谢物的能力）——基本培养基：不同的基本培养基对细胞生长和次生代谢物的合成影响很大。基本培养基中N和P的浓度高往往有利于生长，但不利于次生代谢物的合成。——植物激素：植物激素对次生代谢物生产的影响非常复杂。一般2,4-D促进细胞生长，但抑制代谢物的合成。如在有2,4-D存在时，长春花、蔓陀萝、天仙子、罂粟等细胞不能合成生物碱，鸡眼藤不能合成蒽醌。紫草细胞培养时，IAA能促进紫草素的合成，而NAA，2,4-D则抑制其形成。但高浓度的2,4-D却能促进烟草中泛醌-10的合成。（3）饲喂前体物质（precursor）紫杉二烯试验证明，向培养基中添加紫杉醇合成的前提物质（牻牛儿醇、牻牛儿醇基牻牛儿醇苯甲酸、苯丙氨酸等）可以使红豆杉细胞中紫杉醇含量提高3-5倍；（4）使用诱导子（elicitor）化合物（5）改善培养条件（6）改进培养方法——两相培养法：根据化学反应平衡原理知道，产物的积累会抑制化学反应正方向的速度（反馈调节），还可能会对细胞生长有毒害；移去产物则可以促进化学反应朝正方向进行。因此，如果将产物富集起来、与细胞体系相对隔离，就有利于产物的合成。两相培养可以解决这个问题。两相培养法有2种方式。液—固培养:液相是细胞和液体培养基，固相是能吸收药物成分的物质，如树脂、活性炭等。液-液培养:一层液相是细胞和液体培养基，另一层液相是能溶解次生代谢物的有机溶剂（如乙酸乙酯）。这2种方法都可以减少培养基中有效成分浓度，防止负反馈调节，从而提高代谢物的产量。香竺葵细胞两相培养（液-液培养）：倍半萜的产量提高了500倍。土壤农杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）是一种革兰氏阴性土壤杆菌，在自然界中普遍存在，其特点是能感染双子叶植物，并引起植物形成肿瘤。根癌农杆菌引起的植物肿瘤农杆菌含有Ti质粒,Ti质粒中有一端可以转移的DNA(transferDNA,T-DNA),T-DNA含有生长素和细胞分裂素合成酶基因。农杆菌可以把T-DNA转到植物细胞的染色体上(基因组DNA)，生长素和细胞分裂素合成酶基因表达提高了细胞中生长素和细胞分裂素含量,促进细胞分裂,形成肿瘤。第一步：获得目的基因、构建基因表达盒基因表达盒的结构为：35S启动子控制的GUS基因在烟草中表达特异启动子：只在特定的组织或者器官（根、叶片、花器官、花粉、种子等）中起作用的启动子水稻胚乳特异启动子