基因工程的基本操作程序四班基因工程基础操作程序当前被较广泛提取使用目标基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。1．以下关于基因结构认识中，正确是（）A．大豆基因中内含子是能够编码蛋白质序列B．乳酸菌与酵母菌基因结构中都存在外显子和内含子C．大肠杆菌基因与RNA聚合酶结合位点位于编码区下游D．水稻细胞基因编码区中存在非编码序列2．（多项选择）原核细胞与真核细胞基因结构共同特点是（）A．编码区都有能编码蛋白质序列B．编码区都是连续C．非编码区都能调控遗传信息表示D．非编码区都有RNA聚合酶结合位点一、目标基因获取(1)从基因文库中获取目标基因概念：基因文库（genelibrary）基因组文库:基因文库中包含了一个生物全部基因,这种基因文库叫做基因组文库.个别基因文库:基因文库中包含了一个生物一个别基因,这种基因文库叫做个别基因文库.提取某种生物全部DNA思索：基因文库怎样构建？提取某种生物某器官或特定发育时期mRNAmRNA真核生物基因用逆转录法得到cDNA与原基因相同吗？有哪些差异？原核生物基因呢？基因组DNA文库基因组DNA文库与cDNA文库比较依据：目标基因相关信息。如：依据基因核苷酸序列基因功效基因在染色体上位置基因转录产物mRNA基因表示产物蛋白质等特征1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞A、染色体DNAB、线粒体DNAC、总mRNAD、tRNA（2）利用PCR技术扩增目标基因PCR技术过程1、在遗传工程中，若有一个控制有利性状DNA分子片段为ATGTG／TACAC，要使其数量增多，可用PCR技术进行人工复制，复制时应给予条件是①双链DNA分子为模板②ATGTG或TACAC模板链③四种脱氧核苷酸④四种核苷酸⑤DNA聚合酶⑥热稳定DNA聚合酶⑦引物⑧温度改变⑨恒温A．①③④⑦⑨B．①④⑥⑦⑧C．②⑤⑥⑦⑨D．①③⑥⑦⑧（3）人工合成1、在已知序列信息情况下，获取目标基因最方便方法是A、化学合成法B、基因组文库法C、cDNA文库法D、聚合酶链反应3、目标基因主要是指_______________结构基因。取得目标基因常见方法有三种：（1）从基因文库中获取目标基因，依据基因_________序列，基因在________上位置，基因________产物mRNA，基因_______产物蛋白质等获取目标基因。（2）利用PCR技术扩增目标基因，该技术是一项在________完成核酸合成技术，前提条件是有一段已知目标基因________序列，方便于合成_________。（3）假如基因较小且核苷酸序列已知，能够经过____________方法。二、基因表示载体构建——关键2、基因表示载体作用不能够。因为目标基因在表示载体中得到表示并发挥作用，还需要有其它控制元件，如开启子、终止子和标识基因等。必须构建上述元件主要理由是：（1）生物之间进行基因交流，只有使用受体生物本身基因开启子才能比较有利于基因表示；（2）经过cDNA文库取得目标基因没有开启子，只将编码序列导入受体生物中无法转录；（3）目标基因是否导入受体生物中需要有筛选标识；（4）为了增强目标基因表示水平，往往还要增加一些其它调控元件，如增强子等；（5）有时需要确定目标基因表示产物存在于细胞什么部位，往往要加上能够标识存在部位基因（或做成目标基因与标识基因融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。3.基因表示载体组成：1、（多项选择）一个基因表示载体构建应包含A．目标基因B．开启子C．终止子D．标识基因常见受体细胞：1、将目标基因导入植物细胞（2）基因枪法（3）花粉通道法2、将目标基因导入动物细胞3、将目标基因导入微生物细胞1、基因工程中科学家常见细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是A．结构简单、操作方便B．繁殖速度快C．遗传物质含量少、简单D．性状稳定、变异少2、基因工程常见受体细胞有①大肠杆菌②枯草杆菌③支原体④动植物细胞A．①②③④B．①②③C．②③④D．①②④4.采取基因工程方法培育抗虫棉，以下导入目标基因做法正确是①将毒素蛋白质注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白DNA序列注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白DNA序列与细菌质粒重组，注射到棉子房并进入受精卵中④将编码毒素蛋白DNA序列与质粒重组，导入细菌感染棉体细胞，再进行组织培养A．①②B．②③C．③④D．①④(四)目标基因检测与判定知识延伸——DNA分子杂交技术返回1、用β-珠蛋白DNA探针能够检测出遗传病是A．镰刀状细胞贫血症B．白血病C．坏血病D．苯丙酮尿症思索与探究：4.β-珠蛋白是动物血红蛋白主要组成成份。当它成份异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程方法，使