12 基因工程的基本操作程序.ppt
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1.2基因工程的基本操作程序补:原核细胞的基因结构①不能转录为信使RNA,不能编码蛋白质。真核细胞的基因结构基因工程基本操作的四个步骤一、目的基因的获取(一)从基因文库中获取目的基因2.基因文库的构建方法②反转录法:以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需的基因。③根据已知的氨基酸序列合成DNA法:上述三种目的基因提取的方法有何优缺点?(二)利用PCR技术扩增目的基因①概念:PCR全称为_______________,是一项在生物____复制___________的核酸合成技术⑥过程:1.用一定的_________切割质粒,使其出现一个切口,露出____________。2.用_____________切断目的基因,使其产生_________________。质粒5.基因表达载体的组成:二、基因表达载体的构建——基因工程的核心(三)将目的基因导入受体细胞1、将目的基因导入植物细胞的方法:农杆菌转化法(1)农杆菌介绍:(2)原理及适用范围2、将目的基因导入动物细胞(1)方法:显微注射法(2)程序:(四)目的基因的检测与鉴定DNA分子杂交示意图1)以下说法正确的是()A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来2)不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制()B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNA3)有关基因工程的叙述中,错误的是()A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶4)有关基因工程的叙述正确的是()A、限制酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料5)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是()A、人工合成目的基因B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达