1、原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区编码区上游编码区下游与RNA聚合酶结合位点启动子终止子启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录与与RNARNA聚合酶聚合酶结合位点结合位点RNARNA聚合酶聚合酶AGGTCACGTCGAGGTCACGTCGTCCAGTGCAGCTCCAGTGCAGCAGGUCACGUCGAGGUCACGUCGRNARNA聚合酶聚合酶启动子终止子编码区非编码区非编码区与RNA聚合酶结合位点内含子外显子能够编码蛋白质的序列叫做外显子不能够编码蛋白质的序列叫做内含子启动子终止子编码区上游编码区下游内含子：外显子：原核细胞不具有剪切、拼接原核细胞不具有剪切、拼接mRNAmRNA的能力，所以真核细胞的能力，所以真核细胞的基因不能在原核细胞的受体细胞中正确表达的基因不能在原核细胞的受体细胞中正确表达非编码区非编码区编码区RNA聚合酶结合位点外显子内含子终止子启动子原核真核原核细胞真核细胞不同点编码区是_____的编码区是间隔的、_____的相同点都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的连续不连续编码区非编码苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。想一想需要做哪些工作？苏云金芽孢杆菌毒蛋白毒蛋白普通棉花抗虫棉1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定1、目的基因主要是指______________________编码蛋白质的结构基因苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。目前被较广泛提取使用的目的基因有：22、目的基因的提取方法、目的基因的提取方法直接分离基因直接分离基因人工合成基因人工合成基因反转录法反转录法化学合成法（化学合成法（根据已知根据已知的氨基酸序列合成的氨基酸序列合成DNADNA））供体生物细胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因限制酶mRNA反转录单链DNADNA聚合酶双链DNA①反转录法：人工合成目的基因②根据已知的氨基酸序列合成DNA蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成PCR——DNAPCR?原理：?原料?方式PCR扩增仪DNA复制：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）指数2n模板DNA；DNA引物；四种脱氧核苷酸；热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；离子在DNA聚合酶的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补的DNA链⑤a.变性(90～95℃):b.退火(55～60℃):c.延伸(70～75℃):DNA模板链解旋引物与模板结合，形成局部双链在遗传工程中，若有一个控制有利性状的DNA分子片段为ATGTG／TACAC，要使其数量增多，可用PCR技术进行人工复制，复制时应给予的条件是①双链DNA分子为模板②ATGTG或TACAC模板链③四种脱氧核苷酸④四种核苷酸⑤DNA聚合酶⑥热稳定DNA聚合酶⑦引物⑧温度变化⑨恒温A．①③④⑦⑨B．①④⑥⑦⑧C．②⑤⑥⑦⑨D．①③⑥⑦⑧D二、基因表达载体的构建——核心（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。（2）用___________切断目的基因，使其产生_________________。（3）将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量___________，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）限制酶黏性末端同一种限制酶的黏性末端切口DNA连接酶相同1.过程:质粒目的基因限制酶DNA连接酶重组DNA质粒DNA分