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第一章常用生物学仪器使用第二章生物玻片标本制作技术第三章植物标本制作技术第四章动物标本制作技术第五章生物学教学基本技术第六章现代教育技术第七章食药用真菌的栽培技术第八章经济植物栽培技术第一章常用生物学仪器使用显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。普通光学显微镜结构1.显微镜的分辨率也称为分辨力,它是指能把两个物点辨清的最小距离,分辨距离越大,则分辨率越低。所以,分辨率是以分辨距离来表示的。其计算公式为:D=0.61入/N·AN·A·=n·sina/2式中D为分辨率,A为光波波长,N·A·为物镜的数值孔径(镜口率)。2.镜口率在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,也称数值孔径,它反应该镜头分辨力大小,其数字越大,表示分辨率越高。N·A·=n·sina/2各物镜的镜口率如下表:物镜镜口率(N.A.)工作距离(mm)10×0.255.4040×0.650.39100×1.300.113.放大倍数显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积,公式为:V=V1xV24.焦深焦点深度:显微镜调焦到看清标本某一点时,不仅是这一物点,而且它的上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全厚度,必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。物镜的焦深与镜口率成反比,与放大率成反比。(三)使用方法与注意事项油倍镜的观察:油镜比较精密,价格昂贵,在使用上要注意轻拿轻放;提升镜筒(降载物台),将物镜转离光轴,在盖玻片滴一滴香柏油,把光阑升到最大,换上油镜,小心调节粗准焦螺旋,使油镜慢慢地下降(或载物台上升),从侧面仔细观察油镜下端与标本之间距离,当油镜的下端开始触及油滴时即停止下降(或上升)。从目镜观察,调节细准焦螺旋,直至看清标本物像。要清洁;油镜用擦镜纸蘸少许二甲苯擦试2~3次;瞳距调节孔径光栏调节1.显微镜的擦拭是保养中的重要一环。显微镜要经常保持清洁,避免脏物及试剂沾污显微镜的光学系统和机械装置。2.显微镜的保管普通生物显微镜的保管工作主要是防潮、防尘、防腐蚀、防热四个方面;3.显微镜使用过程中常见故障及维修镜筒下滑转换器失灵镜筒自动倾斜反光镜脱落透镜上出现斑点光圈失调1.以光丁达尔效应为基础,主要采用特制的集光器,即暗视野显微镜的聚光镜中央有当光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至4-200nm的微粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。2.适用观察原虫、细菌鞭毛、伪足运动等,特别适用胶体微粒,在医学检查适用观察体液中螺旋体、结晶或各种粒子、尿形管等。1940年,荷兰学者Zernik巧妙应用光衍射和干涉原理创造相差显微镜。1.利用镜中的特殊装置,即环状光栏和位相板,将光线通过透明标本后产生的光程差转化为振幅差的特种显微镜。2.特殊部件:另外,还有对焦望远镜;3.暗视野显微镜只能看清细胞外形,看不到内部结构,而相差显微镜则不仅能看到外形,而且还能看到内部结构及其细胞分裂等动态变化过程;适用于观察普通光学显微镜看不到的或看不清的活细胞及细胞内结构。荧光显微镜在光学显微镜中占重要地位。它分辨率高,能直接显示细胞内的生物化学成分,彩色效果好;易进行定性定量分析,特别是标记荧光抗体的特异性示踪技术。1.利用紫外光照射,使标本内荧光物质转化为各种不同颜色荧光后,来观察标本内某物质性质和位置。2.装置特点含紫外光高的照明装置:常用高压汞灯或弧光灯产生光源;滤光镜系列:吸热滤光镜、激发滤光镜、阻挡滤光镜等;3.根据光路分为:透射荧光显微镜和落射荧光显微镜;偏光显微镜偏光显微镜(polarizingmicroscope)用于检测具有双折射性的物质,如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。微分干涉差显微镜DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比,其标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。倒置显微镜电子枪电磁透样品室物镜中间镜投影镜观察记录系统2.透射电子显微镜的主要特点扫描式电子显微镜SEM1.原理及结构JEOL扫描电子显微镜(三)超薄切片的制作技术(一)电热干燥箱的原理与构造由两部分组成:一部分是加热、保温装置,是电热干燥箱的主体;另一部分是温度控制系统。1.主体电热干燥箱的主体框架是由各种型号的钢及薄钢板构成。箱内有样品室和加热室。2.温度控制器由感温探头(热敏电阻)、控温电桥、放大电路、控温继电器等几部分组成。(二)电热干燥箱的使用方法放入样品,关好箱门接通电源设置温度和时间参数开启