会计学核酸的理化性质一、核酸的一般性质(xìngzhì)(了解)二、核酸的水解(shuǐjiě)(P503,掌握)糖苷键和磷酸酯键都能发生酸水解，但糖苷键比磷酸酯键更易被酸水解。嘌呤碱的糖苷键比嘧啶碱的糖苷键对酸更不稳定。对酸最不稳定的是嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键。DNA在pH1.6于37℃对水透析即可完全除去嘌呤碱。在pH2.8于100℃加热1h，也可完全除去嘌呤碱。水解嘧啶碱需要较高的温度。用甲酸（98％-100％）密封加热至175℃2h，无论RNA还是DNA都可以完全水解，产生嘌呤和嘧啶碱，缺点是尿嘧啶的回收率较低。改用三氟乙酸在155℃加热60min（水解DNA）或80min（水解RNA），嘧啶碱的回收率显著(xiǎnzhù)提高。RNA的磷酸酯键易被碱水解，产生核苷酸；用于水解RNA的碱有NaOH和KOH，以KON较好，碱浓度一般为0.3-1mol/L，在室温至37℃下水解18～24h即可水解完全(wánquán)。DNA的磷酸酯键则不易被碱水解。DNA一般对碱稳定，在1mol/LNaOH中加热至100℃4h，可以得到小分子的寡聚脱氧核苷酸。总结(zǒngjié)．酸或碱的水解水解(shuǐjiě)核酸的酶类很多。非特异性水解(shuǐjiě)磷酸二酯键的酶称为磷酸二酯酶，如蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶。专一水解(shuǐjiě)核酸的磷酸二酯酶称为核酸酶。①按底物专一性分类两类：以DNA为底物的DNA水解酶（DNases）和以RNA为底物的RNA水解酶（RNases）。②根据作用方式分两类：核酸外切酶和核酸内切酶。作用位点在多核苷酸链内部的为核酸内切酶。从多核苷酸链的末端开始，逐个(zhúgè)的将核苷酸切下，从而使核酸进行降解的酶称为外切酶。③按磷酸二酯键断裂的方式分两类：一种是在3’-OH与磷酸基之间断裂，其产物是5’-核苷酸或寡聚核苷酸。另一种是在5’-OH与磷酸基之间断裂，其产物是3’-核苷酸或寡聚核苷酸。④其它分类标准还有对底物二级结构的专一性，作用于双链核酸的叫双链酶，作用于单链的叫单链酶。核酸外切酶作用的方向性，3’→5’或5’→3’。对磷酸二酯键两侧的碱基有无选择性等。①牛胰核糖核酸酶（RNaseI）只作用于RNA，不作用于DNA。且具有极高专一性的酶，其作用位点是嘧啶(mìdìnɡ)核苷-3’-磷酸与其他核苷酸之间的键（5’-磷酸酯键）。产生3’-嘧啶(mìdìnɡ)核苷酸或以3’-嘧啶(mìdìnɡ)核苷酸结尾的寡核苷酸。(P503)②核糖核酸酶T1具有比RnaseI更高的专一性。他作用的位点是3’-鸟苷酸与其相邻核苷酸的5’-OH之间的连键。产生3’-鸟苷酸或以3’-鸟苷酸结尾的寡核苷酸。③核糖核酸酶T2主要作用点为Ap残基，可以将tRNA完全降解成3’-腺苷酸结尾的寡核苷酸。①牛胰脱氧核糖核酸酶（DNaseI）切断双链DNA或单链DNA成为以5’-磷酸为末端的寡核苷酸，平均长度为4核苷酸。②牛脾脱氧核糖核酸酶（DnaseII）降解DNA成为3’-磷酸为末端的寡核苷酸，平均长度为6核苷酸。③链球菌脱氧核糖核酸酶核酸内切酶，作用于DNA，产物为5’-磷酸为末端长度不同的碎片。④限制性内切酶在细菌中发现，主要降解外源DNA。具有(jùyǒu)严格的碱基序列专一性。它能专一识别并切割DNA上特定碱基序列，产物仍为双链DNA片段。限制内切酶的识别和切割位点通常是4-6bp组成的回文结构。切开后的产物具有(jùyǒu)粘性末端。限制性内切酶在基因工程中得到广泛应用。（4）N-糖苷酶—水解糖苷键。注：生物体内存在多种核酸水解酶。这些酶可以催化水解多聚核苷酸链中的磷酸二酯键。以DNA为底物的DNA水解酶（DNases）和以RNA为底物的RNA水解酶（RNases）。根据作用方式(fāngshì)又分作两类：核酸外切酶和核酸内切酶。核酸外切酶的作用方式(fāngshì)是从多聚核苷酸链的一端（3′-端或5′-端）开始，逐个水解切除核苷酸；核酸内切酶的作用方式(fāngshì)刚好和外切酶相反，它从多聚核苷酸链中间开始，在某个位点切断磷酸二酯键。在分子生物学研究中最有应用价值的是限制性核酸内切酶。这种酶可以特异性的水解核酸中某些特定碱基顺序部位。核酸的两性性质及等电点与蛋白质相似，核酸分子中既含有酸性基团（磷酸基）也含有碱性基团（氨基），因而核酸也具有两性性质。由于核酸分子中的磷酸是一个中等(zhōngděng)强度的酸，而碱性（氨基）是一个弱碱，所以核酸的等电点比较低。如DNA的等电点为4～4.5；RNA的等电点为2～2.5。RNA的等电点比DNA低的原因，是RNA分子中核糖基2′-OH通过氢键促进了磷酸基上质子的解离。DNA没有这种作用。碱