核酸检测医学知识课件.ppt
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主要内容为什么要做核酸检测?核酸检测(基因检测)现知人类的疾病都与基因有直接或间接的关系。医学实验室所要检测和分析的核酸既包括人体本身的基因(DNA)以及反映基因转录水平的mRNA,也包括侵入人体的致病微生物等所携带的外源性基因(DNA/RNA)。传统检测试剂(酶免ELISA)核酸检测输血中可传染病原体的“窗口期”窗口期检测率核酸检测在临床诊断中的应用核酸是什么?核酸(NucleicAcid)是一种主要位于细胞核内的生物大分子,其充当着生物体遗传信息的携带和传递。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内。现已发现近2000种遗传性疾病都和DNA结构有关。肿瘤的发生、病毒的感染、射线对机体的作用等都与核酸有关。核酸分类:DNA、RNA;DNA:dATP(A)、dTTP(T)、dCTP(C)、dGTP(G);RNA:ATP、UTP、CTP、GTP;3’5’磷酸键DNA结构核酸在体内的复制DNA的热变性怎样进行核酸检测?核酸检测的一般流程核酸杂交核酸提取PCRPCR的产生实时荧光PCR荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值,它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上,一般荧光域值的设置是基线(背景)荧光信号的标准偏差的10倍。每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数被称为CT值(thresholdvalue)。荧光定量PCR标记方法SYBRGreen融解曲线分析SYBRGreen法优缺点TaqMan探针法TaqMan法优缺点市场状况生产厂家现状和趋势实时荧光PCR检测的难点试剂质量控制方法谢谢大家!