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第二章生物工业菌种§工业生产常用的微生物及要求霉菌(mould):喜偏酸性环境。可用于生产多种酶制剂、抗生素、有机酸及甾体激素等。放线菌(actionmycetes):原核微生物类群。在含有机质丰富的微碱性土壤中分布较为广泛。主要用于生产多种抗生素担子菌(basidiomycetes):主要用于多糖、橡胶物质和抗癌药物的开发。藻类(alga):许多国家已把它作为人类保健食品和饲料。还可通过藻类将CO2转变为石油;国外还有从“藻类农场”获得氢能的报道。二、微生物工业对菌种的要求:微生物菌种的衰退菌种的复壮菌种的保藏一、菌种的衰退:菌种衰退的原因菌种性能的改变防止菌种衰退的措施菌种衰退的原因菌种遗传特性的改变菌种生理状态的改变菌种遗传特性的改变的原因异核现象导致微生物群体发生变异菌种生理状态的改变菌种培养基营养过于丰富不利于孢子形成,影响发酵;菌种培养基营养贫乏,菌种在营养贫乏的培养基中多次传代会使菌体细胞内缺乏某些生长因子而衰退甚至死亡因此培养基应选择具有传代后生产能力不发生明显下降、菌落不易衰老和自溶的正常形态菌落,孢子丰富的培养基。菌种的复壮提供良好的环境条件定期纯化菌种防止自身突变§生产菌种的改良指两个不同基因型的菌株通过接合或原生质体融合使遗传物质重新组合,再从中分离筛选具有新性状的菌株影响原生质体融合的主要因素影响原生质体再生的主要因素DNA重组技术:就是把外源DNA分子结合到任何病毒、质粒、或其它载体系统中,组成新的遗传物质,并转入宿主细胞内进行繁殖的过程。可以从复杂的DNA分子中分离出单独的DNA片段。可以大量生产高纯度的基因片段及其产物。可以在大肠杆菌中研究来自其它生物的基因。在高等动植物中也可以发展和建立这种基因操作系统。DNA重组过程基因的分离去垢剂溶解细胞,酚和蛋白酶去除蛋白质,核糖核酸酶去除RNA,乙醇沉淀等步骤。特异目的基因的分离主要采用:物理分离法、互补DNA分离法和“鸟枪法”等。DNA分子的切割与连接用限制性核酸内切酶(Ⅱ类,识别顺序通常为4~6个核苷酸)进行切割;限制酶产生的黏性末端、末端转移酶合成的同聚物接尾以及合成的人工接头等,利用DNA连接酶来实现DNA分子的连接载体质粒:重组DNA以转化的方式进入宿主细胞λ噬菌体:重组DNA以转染的方式进入宿主细胞柯斯质粒:以转导的方式进入宿主细胞霉菌(mould):喜偏酸性环境。可用于生产多种酶制剂、抗生素、有机酸及甾体激素等。放线菌(actionmycetes):原核微生物类群。在含有机质丰富的微碱性土壤中分布较为广泛。主要用于生产多种抗生素菌种衰退的原因菌种性能的改变防止菌种衰退的措施§生产菌种的改良影响原生质体再生的主要因素载体