会计学一、概述(ɡàishù)1．高效(ɡāoxiào)液相色谱法与经典液相色谱法4（l）气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物，它们仅占有机物总数的20％．对于占有机物总数近80％的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量(zhìliàng)大的物质，目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析．(2)气相色谱采用流动(liúdòng)相是惰性气体，它对组分没有相互作用力，仅起运载作用．而高效液相色谱法中流动(liúdòng)相可选用不同极性的液体，选择余地大，它对组分可产生一定亲和力，并参与固定相对组分作用的选择竞争．因此，流动(liúdòng)相对分离起很大作用，相当于增加了一个控制和改进分离条件的参数，这为选择最佳分离条件提供了极大方便．(3)气相色谱一般都在较高温度下进行的，而高效(ɡāoxiào)液相色谱法则经常可在室温条件下工作．总之，高效(ɡāoxiào)液相色谱法是吸取了气相色谱与经典液相色谱优点，并用现代化手段加以改进，因此得到迅猛的发展．89101112二、高效(ɡāoxiào)液相色谱仪高效液相色谱(sèpǔ)结构及流程图15泵工作(gōngzuò)示意图2.进样系统高效液相色谱柱比气相色谱柱短得多（约5～30cm），所以柱外展宽（又称柱外效应）较突出．柱外展宽是指色谱柱外的因素所引起(yǐnqǐ)的峰展宽.进样系统是引起(yǐnqǐ)柱前展宽的主要因素，因此高效液相色谱法中对进样技术要求较严．进样方式：注射器2025/3/7193.分离(fēnlí)系统——色谱柱4.检测(jiǎncè)系统1.紫外-可见光检测器⑷缺点(quēdiǎn)①只能检测有紫外吸收的样品；②检测波长＞流动相的截止波长。⑸波长选择①选择λmax作检测波长，以得到较高的灵敏度；②检测波长＞流动相的截止波长。⑹紫外检测器的类型①固定波长型(已淘汰)；②可变波长型(最常用)；③二极管阵列检测器(最新型)。（2）荧光(yíngguāng)检测器（fluorescencedetector）(3)示差折光(zhéguāng)检测器（differentialrefractiveindexdetector）2025/3/7三.液相色谱的固定相与(xiāngyǔ)流动相28化学键合固定(gùdìng)相化学键合固定(gùdìng)相的特点2.液相色谱(sèpǔ)的流动相(2)流动(liúdòng)相类别(3)流动(liúdòng)相选择(4)选择(xuǎnzé)流动相时应注意的几个问题2025/3/7四.高效液相色谱法的主要(zhǔyào)类型41五.液相色谱分离(fēnlí)类型的选择(2)根据溶解度选择如：样品可溶于水并属于(shǔyú)能离解物质，以采用离子交换色谱为佳；如：样品可溶于烃类（如苯或异辛烷），则可采用液--固吸附色谱；（3）根据分子结构选择例如(lìrú)，酸、碱化合物宜用离子交换色谱；脂肪族或芳香族宜用液--液分配色谱或液--固吸附色谱；异构体用液--固吸附色谱；同系物用液--液分配色谱．等等46高效液相色谱仪应用(yìngyòng)实例48492025/3/72025/3/72025/3/7