非洲猪瘟实验室诊断培训课件.ppt
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非洲猪瘟实验室诊断定义可表现为最急性、急性、亚急性和慢性四种形式严重程度与毒株、猪种及流行时间的长短有关急性型以高热、食欲废绝、皮肤发绀、网状内皮系统出血为特征,发病后2-10天内死亡,病死率可高达100%临床上,与古典猪瘟非常相似,难以区分目前没有疫苗!!!只感染猪家猪和欧亚野猪非常易感–感染后存活的猪可能变为无症状的携带者非洲的野生宿主能持续感染很长时间并且没有临床症状软蜱是自然界中的贮主并且可以作为传播媒介法典中将非洲猪瘟的潜伏期定为15天。重要性OIE动物卫生法典要求必须报告的动物疫病我国动物疫病名录一类动物疫病我国《中长期动物疫病防治规划(2012-2020年)》明确重点防范的外来动物疫病特点之一:基因组大病原特点之二:基因多变基因组两端各有一个高变区,基因型多达22个临床症状临床诊断临床诊断临床诊断诊断病理诊断慢性型鉴别诊断实验室诊断实验室诊断实验室诊断的安全原则良好的工作区域GLP(goodlaboratorypractice)实验室诊断技术储备间接ELISA检测病毒抗原分子生物学检测方法荧光PCR检测病毒DNA荧光PCR工作单样品的可追溯性!荧光PCR检测病毒DNA-试剂准备荧光PCR检测病毒DNA-试剂制备荧光PCR检测病毒DNA-仪器设备荧光PCR检测病毒DNA-样本处理提取病毒DNA提取病毒DNA(2)提取病毒DNA(3)荧光PCR检测病毒DNA—OIE方法荧光PCR检测荧光PCR检测病毒DNA-实验结果荧光PCR检测病毒DNA-结果判定实时荧光RPA实时荧光RPA检测ASFV实时荧光RPA检测ASFVASFV的基因型2017/5/15血清学检测方法血清学检测方法确诊免疫印迹(Immunoblotting):半纯化病毒抗原间接免疫荧光(IFI):E70毒株感染的传代细胞免疫过氧化物酶试验(IPT):病毒感染的细胞对操作人员的要求较高免疫印迹(IB)方法免疫过氧化物酶(IPT)非洲猪瘟间接ELISA抗体检测试剂盒血清学诊断小结实验室诊断实验室检测建立的方法在英国OIE参考实验室得到确认。参考资料谢谢大家!