DNA体外重组技术DNA体外重组技术重组DNA技术的发展史技术的发展史重组孕育阶段????1869年，Miescher,核素(chromatin)1869年Miescher,核素(chromatin)核素1928年1928年，Griffith,发现转化现象1944年Avery，1944年，Avery，肺炎双球菌1952年Hershey&Chase,噬菌体1952年，Hershey&Chase,噬菌体肺炎双球菌:肺炎双球菌:天然感受态细菌重组DNA重组DNA理论和技术准备DNA理论和技术准备?1953年，Watson&Crick,DNA双螺旋1953年Crick,DNA双螺旋1953?1958年，Meselson&Stahl，半保留复制1958年Stahl，1958?1961年,Jacob&Monod，乳糖操纵子1961年Monod，1961?1961-66年，Nirenberg&Crick，遗传密码1961-66年Crick，1961?1970年，Smith，限制性核酸内切酶1970年1970?1972年，Mertz-Davis，连接酶1972年Mertz-Davis，1972重组DNA技术的发展（1973重组DNA技术的发展（1973-）DNA技术的发展1973年,Cohen,DNA体外重组。1973年,Cohen,DNA体外重组。体外重组1975年肉瘤病毒（RSV）1975年，Bishop&Varmus在Rous肉瘤病毒（RSV）中发现第一个癌基因Vsrc，1989年诺贝尔医学和生理学奖现第一个癌基因V-src，获1989年诺贝尔医学和生理学奖1976年简悦威（DNA技术首次成功1976年,简悦威（Yuet-WaiKan）用重组DNA技术首次成功）用重组DNA进行α地中海贫血纯合子（即胎儿水肿）的产前诊断。进行α-地中海贫血纯合子（即胎儿水肿）的产前诊断。1973年Cohen重组1973年Cohen重组DNA实验示意图重组DNA实验示意图1977年Sanger等创造了双脱氧链末端1977年Sanger等创造了双脱氧链末端终止法测定DNA序列同时美国Maxam终止法测定DNA序列，同时美国MaxamDNA序列，发明了化学裂解法。和Gilbert发明了化学裂解法。1978年，人类基因文库建立。1978年人类基因文库建立。1981年CechT和Altman从四膜虫中发现具有催化活性RNA，中发现具有催化活性RNA，称为核酶RNA年获诺贝尔化学奖。(Ribozyme)1989年获诺贝尔化学奖。1985年Mullis首创PCR。1993年获诺贝尔奖1989年经美国FDANIH批准批准，1989年经美国FDA和NIH批准，William年经美国FDA和Anderson首次在一患严重复合免FrenchAnderson首次在一患严重复合免疫缺陷的四岁病儿进行腺苷脱氧酶基因导入，标志人类基因治疗的开始。标志人类基因治疗的开始。1990年1990年，美国启动人类基因组计划中国：中国：人、鸡、水稻、表皮葡萄球菌、水稻、表皮葡萄球菌、痢疾杆菌、痢疾杆菌、赖氏钩端螺旋体2000年后基因组计划（蛋白质组计划）2000年，后基因组计划（蛋白质组计划）InternationalHumanGenomeSequencingConsortium(2001)Initialsequencingandanalysisofthehumangenome.Nature409,860–921.860–VenterJCetal.(2001)Thesequenceofthehumangenome.Science291,1304–1351.1304–DNA重组的有关概念DNA重组的有关概念克隆：克隆：通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。同的子代群体。分子克隆：在体外对DNA分子按照既定目的和方案分子克隆：在体外对DNA分子按照既定目的和方案DNA进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNADNA分子的大量拷在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。分子克隆:基因克隆:分子克隆Molecularcloning基因克隆GenecloningDNA重组DNArecombination重组:重组基因工程(geneticengineering)：基因工程(geneticengineering)：有目的地通过分子克隆技术，有目的地通过分子克隆技术，人为地操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。分子克隆技术是基因工程的核心理论上的三大发现：理论上的三