一、DNA的复制方式(深蓝:15N)二、DNA复制的酶学（一）DNA聚合酶的活性5′至3′的聚合活性（5′→3′）DNA-polI5′®3′外切酶活性的功能：原核生物中的三种DNA聚合酶（二）DNA拓扑异构酶(解旋酶）既能水解，又能打断碱基互补配对的氢键拓扑酶Ⅰ切断DNA双链中的一股拓扑酶Ⅱ切断DNA双链（三）单链DNA结合蛋白（SSB）维持模板处于单链状态保护单链的完整（四）引物酶是RNA聚合酶，合成一段RNA引物（五）DNA连接酶（ligase）三、DNA的复制过程1.DNA复制的起点原核生物从一个固定的起始点开始，同时向两个方向进行的，称为双向复制2.复制叉的形成复制叉----复制开始后由于DNA双链解开，在两股单链上进行复制，形成在显微镜下可看到的叉状结构。3.起始的过程DNA复制起始的过程拓扑异构酶拓扑异构酶拓扑异构酶拓扑异构酶(二)DNA复制的延伸冈崎用电子显微镜看到了DNA复制过程中出现一些不连续片段，这些不连续片段只存在与DNA复制叉上其中的一股。后来就把这些不连续的片段称为冈崎片段。3.半不连续复制(三)复制的终止RNA模板五、DNA的损伤修复2.引发突变的因素3.突变分子改变的类型错配（点突变）一个碱基改变缺失、插入和框移突变片段插入或缺失重排较大片段重组或重排镰形红细胞贫血病人Hb(HbS)β亚基缺失或插入都可导致框移突变。5′….UCACGACAUAUG….3′重排(rearrangement)与重组(recombination)4.损伤的修复（一）光修复紫外光照射可使相邻的两个T形成二聚体光修复酶可使二聚体解聚为单体状态，DNA完全恢复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。切除修复机制的基本过程是将受损的DNA片段切除，然后再以对侧链为模板，重新合成新链进行修复。UvrC切除这是DNA的复制过程中所采用的一种有差错的修复方式。修复时，利用重组蛋白RecA的核酸酶活性，将另一股健康亲链与损伤缺口相互交换。RecA重组蛋白修复DNA示意图SOS修复：造成DNA损伤或抑制复制的处理均能引起一系列复杂的诱导效应，称为应急反应（SOSresponse）。此过程诱导产生切除修复和重组修复中的关键蛋白和酶，同时产生无校对功能的DNA聚合酶。第十二章RNA的生物合成(转录)第一节RNA转录合成的特点能够转录RNA的那条DNA链称为模板链(templatestrand)，也称作有意义链或Watson链或负链。而与之互补的另一条DNA链称为编码链(codingstrand)，也称为反义链或Crick链或正链。5′···GCAGTACATGTC···3′RNA转录合成时，以DNA作为模板，在RNA聚合酶的催化下，连续合成一段RNA链，各条RNA链之间无需再进行连接。特定起始点和特定终止点之间的DNA链构成一个转录单位，通常由转录区和有关的调节顺序构成。第二节RNA转录合成的过程（一）转录起始原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)，包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。因子识别转录起始点，并促使核心酶结合形成全酶复合物。转录开始时能与RNA全酶结合的DNA顺序（双链）称为启动子（promoter)启动子序列通常由一些带共性的保守序列构成。被RNA聚合酶辨认的区段就是位于转录起始点-35区的TTGACA序列。酶与该区结合后，即滑动至-10区的TATAAT序列，并启动转录。RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合⑵DNA局部双链解开。1.亚基脱落，RNA聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移；2.在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。RNA转录的延长转录空泡(transcriptionbubble)的形成转录至模板某一位置停止形成磷酸二酯键RNA—DNA杂交链解开DNA解链的部分重新形成双螺旋RNA聚合酶离开DNA不依赖ρ-因子的终止DNA模板上有终止信号转录出来的RNARNA聚合酶遇此结构即停止工作。DNA和RNA（dA：rU）稳定性下降依赖ρ-因子的终止ρ-因子的结构及特点ρ-因子的作用新生RNA（一）转录起始真核生物启动子1）DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)2）-25bp：TATA盒（Hognessbox）3）-90bp：GC盒4）-70bp：CAAT盒真核生物启动子保守序列顺式作用元件是同一DNA分子中具有转录调节功能的特异DNA序列。包括:①启动子──是原核操纵子中启动序列的同义语。②增强子──就是远离转录起始点（1-30kb）、决定基因的时间、空间特异性表达、增强启动子转录活性的DNA序列，其发挥作用