棉花根茎叶中黄酮类化合物的超声提取及含量测定【摘要】目的寻找在超声条件下从棉花根、茎、叶中提取黄酮的优化条件，并测定与比较植株不同部位黄酮类化合物的含量。方法提取采用正交设计法，以乙醇浓度、提取次数、提取温度及固液比为因素，每个因素3个水平进行正交设计；用紫外分光光度法测定黄酮含量。结果最佳提取条件为：乙醇浓度60%，超声温度25℃，固液比1∶10，提取3次。黄酮含量分别为：叶%，茎%，主根%，侧根%，叶柄%。结论棉花植株中黄酮类化合物的含量由高到低依次为：叶，茎，主根，侧根，叶柄。【关键词】棉花黄酮类化合物超声提取Abstract：ObjectiveToascertainoptimumultrasonicextractiontechnologyconditionforflavonoidsfromtheroot,stemandleafofcotton,anddetermineandcomparetheconcentofflavonoidsofdifferentpartsofdesignwasusedtoinvestigatefourfactors(ethanolconcentration,extractiontimes,extractiontemperature,materialandsolventratio)atthreelevelsrespectively,anddeterminethecontentofflavonoidsbyultrovioletoptimumextractionconditionswere60%ethanolextractingwithmaterialandsolventratio1∶10for25℃ultrasonicextractionfor3contentofflavonoidwereleaf%,stem%,taproot%,lateralroot%,petiole%.ConclusionTheorderofthecontentofflavonoidsofdifferentpartsofcottonisleaf﹥stem﹥taproot﹥lateralroot﹥petiole.Keywords：Cotton;Flavonoids;Ultrasonicextraction;Contentdetermination在生态系统中，农业环境日益恶化是一个严峻事实，造成这种状况的原因虽是一个涉及面极为广泛的问题，但其重要原因之一是长期、大量的使用化学杀虫剂而产生了“农药公害”。植物源杀虫剂具有对害虫高效、无残毒，不污染农业生态环境和农产品，对非靶标生物无明显影响等特点。棉花的根、茎、叶中存在的黄酮类化合物,有着重要的抗病虫害作用。在我国的棉花抗虫性基础研究中，棉花黄酮一直是备受注目的次生代谢产物，它们具有对有害生物抗生性、阻食性、抗孢子和酶抑制性的作用［1］，是一类具有很大潜力的抗虫物质。新疆是我国最大的产棉区，年产量一直保持在150万吨左右，占全国棉花总产量的1/3，棉杆、叶资源每年达600~750万吨［2］。为了充分利用新疆这一宝贵资源，笔者对棉花根、茎、叶中的黄酮类化合物进行了提取和含量测定，以便为后续研究打下良好的基础。1仪器与材料1仪器Spectrumlab54紫外可见分光光度计；超声循环提取机；电子天平；TDL-5台式离心机(上海安亭仪器厂)。2试剂和材料乙醇、甲醇、氢氧化钠、浓硫酸、苯酚(5%)、盐酸、氢氧化钾(10%)、氢氧化钠(均为分析纯)。棉花根、茎、叶等。(取自石河子大学农学院试验场)。2方法黄酮含量测定方法本研究以芦丁为标准品，用紫外分光光度计测定黄酮含量。标准曲线的绘制：精密称取120℃干燥至恒重的芦丁标准品适量，加水溶解，转移至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密吸取此溶液、、、、、、，分别置于25ml容量瓶中，各加60%乙醇至10ml，分别加入5%NaNO2溶液ml,放置6min，然后加入10%Al(NO3)3溶液，混匀，再放置6min，加入4%NaOH溶液4ml，用水稀释至刻度，混匀，放置15min，在分光光度计上扫描波长从400～600nm之间的吸收度,在510nm波长处有最大吸收值,以吸光度为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标做标准曲线，数据经回归处理，计算得回归方程：y=，r=。单因素实验乙醇浓度取棉花茎4g，50ml30%乙醇为溶剂，25℃下超声提取两次，30min/次。再在相同条件下分别以40%,50%,60%,70%,80%,90%乙醇为溶剂提取。过滤，滤液分别用紫外分光光度计测定吸光度,并计算出黄酮类化合物含量。超声温度取棉花茎4g，30%乙醇50ml，分别在25，35，45℃下超声提取。过滤，滤液分别用紫外分光光度计测定吸光度,并计算出黄酮类化合物的含