概述生物技术产品的生产和管理按生物制品的要求进行，不仅对最终产品的质量实施有效控制，而且特别重视对生产工艺的全过程进行质量控制,其中包括对每个生产步骤的验证、质量检定（QC）、质量保证部（QA）对生产和质量检定的全过程进行严格的管理。1、概念：2、分类｛2、重组DNA药物包括：寡核苷酸药物：反义核酸等；基因药物：腺病毒-IL-2、腺相关病毒-凝血Ⅸ因子；腺病毒-P53细胞治疗制剂：抗原致敏的人树突状细胞DNA疫苗：治疗乙型肝炎、爱滋病的核酸疫苗等。我国生物技术药物质量标准研究现状生物技术药物质量标准研究的依据生物技术药物质量标准研究的内容研究建立灵敏、稳定的理化性质、纯度、含量的测定方法及质控标准。研究建立目标产品的生物学功效的测定方法及质控标准；建立用于药物生物学功效检定用的细胞系和动物模型。运用生化标准化原则，以WHO国际标准品为对照，研制出国家标准品或参考对照品。在效价定义上要求与国际单位一致；没有国际标准品的新药，则根据标准品要求自行研制国家参比品。外源DNA、菌体蛋白质、细菌内毒素以及病毒、支原体、细菌等在工艺中加入有害物质的检测。重组产品质量控制上存在的难点我国基因工程产品安全管理法规和技术指南生物技术药物的质量控制生物技术药物的质量控制质量控制方法学研究具体内容一、生物学活性测定和比活性效价测定一般原则1、国际通用方法；2、测定结果须用国际或国家标准品校正，以国际单位表示。生物学活性测定方法分类取兔离体动脉条剪成约1.5cm长、2～3mm宽的螺旋环，悬挂于含10mL通氧的37℃台氏液(取NaC18.0g、KC10.2g、CaCl20.2g、NaH2PO40.05g、MgSO4·7H2O0.1g、NaHCO31.0g、Glucose1.0g用蒸馏水配成1000mL的溶液，置于玻璃或塑料瓶中，用1mol·L-1NaOH溶液调pH至7.4)的麦氏浴槽中，加负荷1g，稳定1h，期间每20min换1次台氏液：连接多导记录仪，调节灵敏度，记录血管的张力变化。待张力曲线基线稳定后，加入1.25mg·mL-1盐酸去氧肾上腺素溶液0.05mL于麦氏浴槽中使其终浓度为6.25×10-5mg·mL-1，曲线升高至最高并稳定后，开始按累计浓度给药法(曲线稳定后对倍增加样品浓度为：6.25×10-5～8.0×10-2RU·mL)加入重组人脑利钠肽对照品，记录血管的张力变化。完成上述给药后，洗脱并稳定1h，期问每20min换1次台氏液。待基线稳定后，按测定对照品的方法测定待测样品，记录测定结果。计算对照品和各实验样品的半效稀释倍数，按下式计算样品效价：样品效价=对照品效价×样品半效稀释倍数／对照品半效稀释倍数利用动物体内某些指标变化，定出产品的单位，如EPO活性测定，体内注射EPO后，计算小鼠网织红细胞增加的数量与标准品比较，确定其活性单位。基于产品与某种物质的结合或产品本身的化学反应为原理设计，具有简便、精确、稳定等特点，如重组链激酶、葡激酶生物活性测定，链激酶、葡激酶和纤溶酶原（h-plg）结合形成复合物激活游离h-plg原为有活性的纤溶酶。利用制品免疫原性，制备相应单克隆抗体或多克隆抗体，采取ELISA法测定其含量。生物学活性测定方法选择生物学活性测定方法选择细胞培养法中细胞染色标记方法AlamarBlue：氧化型AlamarBlue（600nm）可被活细胞中的线粒体酶还原，还原后染料（570nm）发生颜色和荧光改变，颜色和荧光的深浅与活细胞数成正比，可用分光光度计或荧光检测仪检测。Crystalviolet：染活细胞后，在比色计中测定光吸收值（A），A值与着染色细胞数成正比。生物学活性测定分析方法蛋白质药物的比活性测定的意义生物活性测定标准范围确定不同生物活性测定方法的规定标准表测定方法规定标准动物基础的生物活性测定70%～130%标示量细胞基础的生物活性测定80%～120%标示量体外酶法的生物活性测定85%～115%标示量受体结合的生物活性测定85%～115%标示量生物学活性效价测定过程中标准品的作用二、蛋白质纯度检查非还原SDS-PAGE电泳法：1、银染加样量≥5ug（1～10ng）2、考马斯亮蓝R-250加样量≥10ug（100ng）结果：无明显杂蛋白带出现；目标蛋白量应不低于总蛋白量的95%或98%。蛋白质样品在荷质比均一。HPLC法：分子筛、反相层析，离子交换层析，尽量采用与SDS-PAGE原理不同的反相或离子交换层析，不主张用分子筛分析。毛细管电泳：简便、快速、灵敏度和分辨率高；价格高、重现性差。三、蛋白质含量测定灵敏范围：5～100ug/ml；优点：简便、灵敏度较高；不同蛋白质间的变异少；缺点：受多种物质干扰，反应速度慢，某些试剂不稳定。Bradfor