化学发光介绍化学发光免疫分析方法简介化学发光免疫分析（ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA）是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛，已占各种免疫分析的首位，是目前放射免疫分析和酶联免疫分析最佳的取代者。化学发光免疫测定是目前世界公认先进的标记免疫测定技术，化学发光免疫分析技术具有高度的准确性和特异性，成为检验方法中最为重要的技术之一。化学发光免疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体免疫功能、传染性疾病、内分泌功能、肿瘤标志物、性激素、甲状腺功能等方面的体外诊断实验中。化学发光是一种特异的化学反应，有机分子吸收化学能后发生能级跃迁，产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体，当其返回到基态而发出光子，即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术，即为化学发光免疫分析。化学发光的发光类型通常分为闪光型（flashtype）和辉光型（glowtype）两种。闪光型发光时间很短，只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型，发光时间从几分钟到几十分钟，或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量，必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使用通用型仪器，也可以配全自动化仪器。北京泰格科信的化学发光免疫分析诊断试剂发光类型为辉光型。化学发光免疫分析的优势分析方法简便快速绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步模式。结果稳定、误差小样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源稳定性、光散射、光波选择器等）给分析带来的影响，使分析结果灵敏稳定可靠。安全性好及使用期长免除了使用放射性物质。到目前为止，还未发现其危害性；试剂稳定，保存期可达一年。目前化学发光开展的项目为什么要开展乙肝“两对半”定量检测一、化学发光极大地提高了检测灵敏度HBsAg是HBV感染的特异标志，HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊断，绝大多数HBV感染者外周血可出现HBsAg。化学发光免疫分析检测HBsAg灵敏度可达0.2ng/ml，而酶标（EIASA）检测的灵敏度为2ng/ml，放射免疫（RIA）灵敏度为1ng/ml，化学发光免疫分析极大地提高检测的灵敏度。因此，在急性乙肝早期化学发光免疫分析检测能及早检出HBsAg，缩短窗口期的时间，而酶标检测在乙肝早期往往HBsAg呈阴性；其次，可发现低浓度HBsAg携带者；在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，酶标检测可出现HBsAg和表面抗体（HBsAb）均阴性的情况，化学发光免疫分析检测的高灵敏度则可避免这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。并且目前病毒性肝炎和其他病因所致的肝病甚多，而且临床症状、体征及肝功能无特殊改变差异，故只有依靠高灵敏度的病原学鉴别诊断。1．缩短急性乙肝HBsAg测定“窗口期”2．如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA测不出抗原，而化学发光免疫分析定量具有极高的灵敏度，可发现并极有可能同时测定出HBsAg和HBsAb。3.可发现低浓度HBsAg携带者。特别是一些群体如医护工作者、病人家属等，由于长期密切接触，但又非直接经血传播感染成急性乙肝，而是长期少量感染，并刺激机体产生一定的免疫力，可能呈低浓度感染，特别应当引起人们的足够重视，密切关注并采取措施防止发展成乙肝或慢性携带者。二、两对半定量可动态观察疗效和病情监测疾病的发生、发展、疗效、预后是一个动态的变化过程，化学发光免疫分析定量检测乙肝“两对半”各项标志物的浓度变化可对乙肝的病程、治疗、预后起动态监测的作用，能够让医生对病情疗效作出合理的解释提供依据，指导治疗。1、定量检测HBsAg，对肝炎病人动态疗效观察很有价值。HBsAg和HBsAb浓度的变化，可以预见急性乙肝是否处于恢复期。如HBsAg浓度降低，HBsAb的浓度逐渐升高，可说明病情正往恢复期发展。反之，HBsAg浓度处于较高水平或上升趋势，而HBsAb一直处于较底水平，则容易发展为慢性乙肝或携带者。2、定量测定HBeAg和HBeAb浓度的变化，可以反映病情变化和治疗效果。明确测定HbeAg向抗-Hbe转换的时期，即表现为HbeAg浓度下降和抗-Hbe浓度升高的过程。高浓度的HbeAg还可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高的传染性。高浓度的抗-Hbe一方面提示病情的好转，而在某些时候（如肝功能指标很差）可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关。3、HBcAb浓度的高低可以反映病毒感染的状态，高浓度的HBcAb提示乙肝急性感染；低浓度一般为恢