第1章微生物培养技术章末复习提升课微生物技术1.培养基的制备计算——称量——溶化——灭菌——倒平板。2．无菌技术主要指消毒和灭菌。实验室中常用紫外线或化学药物消毒，如用酒精棉球擦拭双手。灭菌的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。另外，实验操作应在无菌环境中，例如酒精灯火焰旁。3．倒平板操作待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，严格遵循课本上的操作步骤。4．平板划线操作平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线或交叉划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。5．稀释平板涂布法先将菌悬液进行系列稀释然后涂布平板，在稀释度足够高的菌悬液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。6．应用选择培养基分离某种特定的微生物选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。本专题中有选择分解尿素的细菌和纤维素分解菌的两种培养基。测定某种微生物的数量每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M。总之，在实验室培养微生物中一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。章末综合测评(一)(时间：45分钟满分：100分)一、选择题(每小题6分，共60分)1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含有()A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素【解析】培养基中一般都含有水、无机盐、碳源、氮源，有的培养基中还含有生长因子。【答案】C2．下列对四种微生物的相关叙述，错误的是()A．CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化B．CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能C．糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解D．葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源【解析】乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型，生命活动所需能源主要来自糖类氧化分解形成乳酸时释放的能量，其生命活动过程中不能直接利用N2作为氮源。【答案】C3．产生标准菌落的最初数目和培养基分别是()A．同种少数细菌，液体培养基B．许多细菌，液体培养基C．同种少数细菌，固体培养基D．许多细菌，固体培养基【解析】在液体培养基中生活的细菌，无论是一个还是许多，都是肉眼不可见的。在固体培养基上的细菌，当数目较少时也是不可见的。而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，所以肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态。【答案】C4.(2013·江苏高考)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次【解析】微生物分离中培养基的制备应是先灭菌再倒平板，A项错误；每一次划线前都要灼烧接种环，以杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B项正确；接种后的培养皿应在恒温培养箱中进行培养，光照会影响温度等条件，C项错误；培养过程中观察的间隔时间不能太长，适宜条件下一般不超过24h，D项错误。【答案】B5．固氮菌可以从豆科植物的根瘤中分离出来，有关说法错误的是()A．选用大且红润的豆科植物根瘤B．分离培养固氮菌的关键是杀死表面杂菌C．因材料过大，不能采用平板培养基分离技术D．可以利用选择培养基进行纯化【解析】题目中的固氮菌应是根瘤菌。可以在缺氮的培养基上选择培养，也可以利用琼脂平板划线法进行分离。当然，杀死根瘤表面杂菌，将内部根瘤菌制成菌落是实验的关键。【答案】C6．把乳酸菌、酵母菌、硝化细菌三种不同类型的微生物分别培养在三个半固体培养基中，几天后观察结果如图所示(图中阴影表示微生物的生长状况)，下列叙述正确的是()A．甲管中培养的微生物的异化作用类型是自养型B．从结构上看，丙管中培养的微生物具有成形的细胞核C．乙管中培养的微生物可以进行出芽生殖D．这三种微生物所需的碳源均为有机碳源【解析】乳酸菌是原核生物，属异养厌氧型生物，酵母菌是真核生物，属兼性厌氧型，生殖方式有出芽生殖和分裂生殖两种，硝化细菌是原核生物，属自养需氧型生物。【答案】C7．细菌培养过程中，分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法可依次用于消毒或杀灭哪些部位的杂菌()A．接种针、手、培养基B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针D．接种针、培养基、手【解析】