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第一节细菌遗传变异的物质基础二、质粒(plasmid)几种重要的质粒致育质粒(F质粒)耐药质粒毒力质粒(Vi质粒)细菌素质粒代谢质粒三、转座因子插入序列(insertionsequence,IS)是最小的转位因子,<2kb,不携带任何已知与插入功能无关的基因区域。转座子(transposon,Tn)>2kb,除携带与转位有关的基因外,还携带耐药性基因、抗金属基因、毒素基因及其他结构基因。可能与细菌的多重耐药性有关。转座子的特征转座噬菌体或前噬菌体是一些具有转座功能的溶原性噬菌体,当整合到细菌染色体上,能改变溶原性细菌的某些生物学性状。Mu分子量约2~2.5kb,与一般温和噬菌体不同,它可整合到大肠杆菌染色体的任何位置,从而引起插入突变。四、毒力岛(PAI)PAI是指病原菌的某个或某些毒力基因群,分子结构与功能有别于细菌染色体,但位于细菌染色体之内,因此称之为“岛”。笫二节基因突变一、细菌变异的类型细菌的变异可分为非遗传性变异和遗传性变异。前者基因无改变,只是为了适应外界环境的不适而发生的暂时性性状改变,细菌的菌落形态变异多属于此;后者基因发生改变,引起相应性状的稳定可遗传的变化,因基因突变和基因重组所致。遗传性变异(基因型变异)非遗传性变异(表型变异)细菌的基因突变按发生改变的范围大小,分为染色体畸变和点突变。染色体畸变是指染色体一大段发生了变化,包括缺失、重复、插入、易位和倒置。点突变是相应基因上的DNA链中一个或少数几个核苷酸对的改变,包括核苷酸对的置换(进一步可分为转换与颠换)和因缺失或插入而造成的移码。细菌的突变也可分为自发突变和人工诱变。自发突变是在未经人工改变的外界条件下,自然发生的突变,它经常发生,但发生的机率很低,通常仅约10-6~10-9。人工诱变是在应用诱变因素的影响下而发生的突变,其突变率常高于自然突变。二、细菌常见的变异现象菌落形态变异由于细菌基因突变而引起其抗原结构发生改变的变异类型。当编码细菌的抗原结构包括菌体抗原、鞭毛抗原、荚膜抗原等的基因发生突变时,细菌形成相应抗原结构的能力丧失,引起细菌抗原性变异。如常见的细菌细胞壁缺陷变异(细菌L型等)、荚膜变异或鞭毛变异等。特殊结构的变异42-43℃炭疽杆菌失去形成芽胞能力,毒性降低10-20天变形杆菌0.1%石炭酸迁徙生长(H)点状生长、单个菌落(O)抗性变异营养型变异第三节基因的转移和重组转化(transformation)转化试验转导(transduction)普遍性转导generalizedtransduction供体菌局限性转导restrictedtransduction普遍性转导与局限性转导的区别接合(conjugation)原生质体融合转染受体菌获得从噬菌体而非从其它供体菌提取的DNA的过程,称为转染。另外,转染一词更广泛地用于真核生物细胞,其含义有差别,指真核细胞通过病毒感染,获得某一片段DNA或RNA的过程。与原生质体融合一样,转染也是一种人为的手段,通常多用于哺乳动物细胞,往往为了获得重组病毒而设计。非遗传变异点突变细菌的变异基因突变易位、倒置、插入染色体畸变缺失、重复遗传性变异转化外源性基因的转移转导接合原生质体融合转染第四节细菌遗传变异的实际意义二、在治疗上的应用耐药菌株日益增多,为确保治疗效果,应事先做药敏试验,选用敏感药物治疗。同时可以使用两种或两种以上药物,以减少耐药菌株的出现而提高疗效。三、在预防上的应用卡介苗、炭疽菌苗等都是用病原微生物的减毒株来制成的。目前则应用变异的原理通过选择和基因工程来获得新的变异株,以制备更理想的菌苗如:基因工程多价联苗。四、在基因工程方面的应用基因工程(重组DNA技术):是根据遗传变异中细菌可因基因转移和重组而获得新性状的原理设计的。主要步骤:目的基因分离-----目的基因与载体(质粒或噬菌体)的重组-----重组DNA转入受体菌(转化)-----筛选重组DNA克隆----复制与表达。