第一节、毛细管色谱2.毛细管色谱分离能力提高的途径(1)由塔板理论：增加柱长减小柱径，即增加柱子塔板数；(2)由速率理论：减小组分在柱中的涡流扩散和传质阻力，也即降低塔板高度4.毛细管色谱的种类与制备方法5.毛细管色谱实验技术1.基本原理及方法特点:4.裂解器第三节、顶空气相色谱的技术与应用理论依据一、概述GC-MS中的分子分离器四极杆质量分析器￥三、LC-MS联用仪器（2）大气压化学电离2.离子阱质量分析器在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同可实现分离。2.高效毛细管电泳技术上的重要突破3.高效毛细管电泳(HPCE)基本原理所以，迁移速度：二、电渗现象与电渗流2.HPCE中的电渗现象与电渗流3.HPCE中电渗流的大小与方向HPCE中电渗流的方向4.HPCE中电渗流的流形5.HPCE中电渗流的作用三、HPCE中影响电渗流的因素3.电解质溶液性质的影响缓冲溶液离子强度，影响双电层的厚度、溶液黏度和工作电流，明显影响电渗流大小。缓冲溶液离子强度增加，电渗流下降。4.温度的影响5.添加剂的影响四、淌度mobility五、HPCE中的参数与关系式3.分离度六、影响分离效率的因素—区带展宽3.焦耳热与温度梯度的影响4.溶质与管壁间的相互作用5.其他影响因素1、仪器流程与主要部件1）高压电源3）缓冲液池2、毛细管电泳的进样方式毛细管一端插入样品瓶，加电压；八、高效毛细管电泳分离模式1、毛细管区带电泳(CZE)＃2、毛细管凝胶电泳(CGE)1)缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，其浓度达到临界浓度，形成一疏水内核、外部带负电的胶束。2)电泳流和电渗流的方向相反,且ν电渗流>ν电泳，负电胶束以较慢的速度向负极移动；1)根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术；2)毛细管内充有两性电解质（合成的具有不同等电点范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物），当施加直流电压（6～8V）时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度；3)氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有关，在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电点时，呈电中性，淌度为零；4)聚焦：具有不同等电点的生物试样在电场力的作用下迁移，分别到达满足其等电点pH的位置时，呈电中性，停止移动，形成窄溶质带而相互分离；1.将两种淌度差别很大的缓冲液分别作为前导离子(充满毛细管)和尾随离子，试样离子的淌度全部位于两者之间，并以同一速度移动。2.负离子分析时，前导电解质的淌度大于试样中所有负离子的。所有试样都按前导离子的速度等速向阳极前进，逐渐形成各自独立的区带而分离。阴极进样，阳极检测。3.不同离子的淌度不同，所形成区带的电场强度不同(ν=μE)，淌度大的离子区带电场强度小；沿出口到进口，将不同区带依次排序1、2、3、4电场强度依次增大。假设“2”号中离子扩散到“3”号，该区电场强度大，离子被加速，返回到“2”区；当“2”号中离子跑到“1”号区，离子被减速使之归队；4.特点：界面明显，富集、浓缩作用；在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定液，以电渗流为流动相，试样组分在两相间的分配为分离机理的电动色谱过程；九、高效毛细管电泳应用与进展1、离子分析阴离子分析2、药物分析采用MEKC模式，鉴定违禁药物；效果优于HPLG法3、手性化合物分析4、氨基酸与蛋白质分析蛋白质分析5、核酸分析及DNA排序6、新进展