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会计学(二)主要特征1在培养容器中进行;2无菌培养环境,排除了微生物如真菌、细菌以及害虫等的侵入;3各种环境因子如营养因子、激素因子以及光照、温度等物理因子处于人工控制之下,并可达到最适条件。4通常打破了正常的植物发育过程和格局;5随着单细胞和原生质体培养技术的发展,对植物显微结构进行操作成为可能。(三)植物组织培养类型:根据不同分类的依据可以分为不同类型。1.根据培养材料不同分为:完整植株培养(PlantCulture):对幼苗和较大植株等的培养。胚胎培养(EmbryoCulture):包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。器官培养(OrganCulture):包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。组织培养(TissueCulture):如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。细胞培养(CellCulture):指对单细胞或较小的细胞团进行培养。原生质体培养(ProtoplastCulture):指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。矮牵牛茎尖离体培养培养微型月季茎段离体培养花烛叶片离体快速繁殖大蒜根尖培养及植株再生大蒜试管鳞茎诱导人参细胞悬浮培养非洲紫罗兰原生质体分离、培养及植株再生2.根据再生途径分为:◆器官发生途径(Organogenesis):直接器官发生途径:植物器官可以直接由外植体上诱导。如茎尖培养。间接器官发生途径:成熟细胞经过脱分化(dedifferentiation)及再分化(redifferentiation)过程而形成新的组织和器官的过程。如叶片培养。◆体细胞胚胎发生(Somaticembryogenesis):体胚发生途径是指二倍体或单倍体的体细胞在特定条件下.未经性细胞融合而通过与合子胚发生类似的途径发育出新个体的形态发生过程。经体胚发生形成类似合子胚的结构称为胚状体(embryoid)或体细胞胚(somaticembryo).贯叶金丝桃不定芽直接再生过程优化培养基无蔗糖1%蔗糖5%蔗糖优化培养基无蔗糖1%蔗糖5%蔗糖台湾百合离体培养大花蕙兰原球茎增殖与植株再生大蒜愈伤组织培养日本牵牛花的离体培养/禾本科牧草的体胚发生过程菊花体细胞胚胎发生及植株再生大蒜体细胞胚胎发生过程/人工种子(Artificialseed,SyntheticSeed):是指植物离体培养产生的胚状体或不定芽被包裹在含有营养和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒体。作为繁殖材料。/3.根据培养基的类型分为:固体培养(Solidculture):琼脂、卡拉胶等固化。半液半固体培养(SemisolidCulture):固液双层。液体培养(LiquidCulture):震荡、旋转或静置培养。液体培养的优点:A不使用凝固剂,节约生产成本B营养吸收充分;C操作过程简化。固体培养:体胚液体培养不同类型液体培养装置菠萝种苗液体培养系统丹参毛状根培养分类属性二、植物组织培养发展简史1、理论准备阶段(探索阶段)(20世纪30年代前)①1667年,虎克(R.Hooke)发现细胞;1756年,Duhamel发现了愈伤组织形成。②1838—1839,Schleiden(1838施莱登提出植物细胞学说)和Schwann(1839年施旺认为细胞学说也适用于动物)创立了细胞学说。③1902年德国的Haberlandt(哈布兰特):“植物离体细胞培养试验”。提出了高等植物的器官和组织可以不断分割、直至单个细胞,并大胆提出在试管培育植物,预言离体细胞在生理、发育上有潜在的全能性。即:所有植物的细胞在适当的条件下具有不断分裂和繁殖并发育成独立个体,可增殖,具有分化为完整植株的潜在能力。Cell有全部遗传信息和发育成完整植株的能力,但处于完整植株的生活细胞受整体Cell控制(即gene受阻orother发挥作用),完整植株上Cell细胞只表达一定形态生理功能。2、发展时期(奠基阶段,30年代中至50年代末)组培的真正建立和发展,从1934年开始才算有了突破。1933李继侗、沈同用银杏胚乳提取物培养银杏胚→获得成功,(获得3mm以上大小的胚,即可正常生长成小植株)并发现胚乳提取物能促进银杏离体胚的生长,为后人利用植物组织提取液促进培养物生长提供了实验根据。这是首次利用天然提取物。1934年,美国的White(怀特)用无机盐、糖类和酵母抽提物的培养基进行番茄根尖切段培养,建立了第一个活跃生长的无性繁殖系。无机盐、三种B族维生素、取代酵母浸出液(1934→1968)继代1600代后仍能正常生长。1943年,white出版了第一本专著《植物组织培养手册》《AHandBookofPlantTissueCulture》。1945年F.Skoog和崔澄发现腺嘌呤促细胞分裂、组织成芽。