儿童锌缺乏筛查金标准的临床研究可行性报告一、立项的背景和意义近年来，通过深入的临床观察和实验研究，发现微量元素锌与小儿的体格生长、智力发育、免疫功能等都有密切关系。因此，锌在儿童保健领域越来越受到重视。由于婴幼儿生长发育速度快，锌需要量相对多；中国传统膳食中植物酸含量高，锌吸收率低；而且婴幼儿易出汗，较多锌从汗液中排出（汗液含锌17.59umol/L）[1]。因此，婴幼儿易发生锌缺乏。儿童锌缺乏是我国儿童营养面临的严峻问题之一[2]。上海交通大学医学院附属新华医院前期研究表明上海市新华医院儿保门诊0-6岁锌缺乏患病率高达27%[3]。由于锌缺乏临床症状呈非特异性，因此，锌缺乏的诊断以实验室检测为主。但目前在临床上广泛使用的血清锌不能反映早期锌缺乏，也不能敏感可靠地反映锌营养状况；另外，血清锌的检测应取静脉血，而临床上婴幼儿静脉血取样困难，家长依从性差，目前上海各社区医院对婴儿用末梢血常规检测血清锌，严重影响了血清锌的准确性，进一步造成诊断上的不准或困难。总之，目前儿童锌缺乏早期诊断困难，致使锌缺乏进一步加重而最终影响生长发育；另一方面，取样困难也影响治疗中疗效指标的随访，常致过量补锌，导致慢性锌中毒。因此，探索一项简单可行的儿童锌缺乏早期筛查和疗效判断指标迫在眉睫。二、国内外研究现状和发展趋势1．目前锌缺乏实验室诊断指标的局限性血清锌：目前尚缺乏敏感、可靠和特异的评价锌营养状况的指标。血清锌被广泛用于临床上锌缺乏的诊断。但研究资料表明，血清锌仅在重度缺锌时才能反映锌营养变化，但对中、轻度缺锌无反应[4]，主要是由于体内平衡调节系统的作用，如果锌供给缺乏，组织内锌将调至血中，血清锌水平仅在体内平衡负担过度时才发生变化。因此，血清锌不能反映早期锌缺乏，而此时机体己有纳差等缺锌的早期临床表现[5]。另有资料表明，血清锌也不能很好地反映锌的补充，补锌组给予10天锌补充，血清锌仅在补锌后的2-6天上升，第8天即降至补锌前水平，主要是由于补锌一段时间后，机体己适应高锌补充而通过代谢调节使血清锌维持在正常范围[6]。因此，仅占机体总锌量不足1%的循环血清锌，不是锌状况的良好参数[6]。此外，多种生理、病理状态皆可影响血清锌浓度，如进食、饥饿、体力活动、妊娠以及应激状态（如感染、心肌梗塞、灼伤、手术等）[7]。所以，在日常临床工作中，尤其在对病人情况不甚了解时，常常很难确定血清锌的降低是否与体内锌缺乏有关。WHO建议血清锌适合用于评价群体锌营养状况[8-10]。头发锌：头发样品的采集、运送、贮存都较方便，易为儿童及家长所接受，因而国内外一度将发锌含量作为锌缺乏症的诊断指标之一，但影响发锌含量检测值的因素较多，难以控制。课题组曾同时测定467例小儿血清和头发锌含量，结果显示，二者无相关性。有研究表明，严重缺锌时，影响核酸和蛋白质合成，致使毛发生长缓慢，从而发锌值可能处于正常范围甚至超过正常高限[11]。当前多数人采用的正常异常发锌分界值，其误诊率（假阳性率）和漏诊率（假阴性率）皆达20-30%[11]。因而，发锌不能作为锌缺乏的诊断和疗效判断指标。1986年世界卫生组织微量元素专家小组认为，发锌不能作为判断个体锌营养状况的可靠依据[11]。单核细胞金属硫蛋白mRNA：1997年SullivanVK等[12]首先建立了用竞争性反转录酶-多聚酶链反应(RT-RCR)方法测定补充锌后人单核细胞和培养THP-1细胞中金属硫蛋白mRNA表达的变化。实验结果表明，培养基中加入硫酸锌组的THP-1细胞的金属硫蛋白mRNA含量显著增加；人体补充锌6天，人单核细胞中的金属硫蛋白mRNA显著高于对照组,并持续增加到第15天。第6天时的血清锌比初始时的高约80%，第15天时的血清锌比初始时的显著增加，但与6天时的相比则显著降低。结果表明测试单核细胞中金属硫蛋白mRNA水平对补锌的反应比测试血清锌用于诊断人锌营养状况可靠。目前为止越来越多的研究进一步证明单核细胞金属硫蛋白mRNA可良好反映边缘性锌缺乏[13]，被认为是评价锌营养状况的相对金标准。但其作为实验室研究方法，其操作复杂，难以在临床上推广。2．儿童食欲减退与早期锌缺乏之间的关系食欲减退是小儿缺锌的最常见早期症状[11]。国内外大量的动物及临床研究表明，食欲减退与锌缺乏密切相关，大部分的患者补锌后食欲明显好转[14-15]。食欲减退是由于患儿味觉敏感度降低所辞，缺锌引起食欲减退的机制是：a.缺锌妨碍核酸与蛋白的合成，因此细胞转换率很高的味蕾易于受累[16]；b.正常人唾液的味觉素每分子中含2个锌离子，它对味蕾及口腔粘膜提供营养，故缺锌时味觉减退且易患复发性口腔炎[17]；c.唾液碳酸酐酶是由锌离子组成的酶，它存在于味蕾中，缺锌时唾液中碳酸酐酶减少，故味觉功能减退[18][19]。3．唾液