项目14凝血因子检查模块1内源性凝血系统的检验基础理论血液离体，血细胞下沉。上层析出的黄色清亮液体是血清？还是血浆？血浆：离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，即血浆。血清：离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，即血清。血清与血浆的区别：主要在于血清不含纤维蛋白原。纤维蛋白原能转换成纤维蛋白，具有凝血作用。血液凝固定义：血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程。方式：激活凝血系统，使血浆中纤维蛋白原纤维蛋白，形成纤维蛋白网加固血小板血栓（有效止血）。血管损伤暴露血管内皮下胶原血小板激活（粘附、聚集、释放）血小板止血栓血凝块形成（一）凝血因子(bloodclottingfactor)定义：血浆与组织中直接参与血液凝固的物质。种类：13种（其中FVI是FVa，实为12种)。因子凝血因子的特点①除Ca2+和磷脂外，其余凝血因子均为蛋白质②除FIII（组织因子）外，其他凝血因子均存在于新鲜血浆中，FⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ在肝脏合成，需维生素K参与。③凝血因子以无活性酶原形式存在血液中，经其他酶水解后暴露或形成活性中心，才有活性，这一过程称凝血因子的激活。激活后，在该因子右下角标上“a”④在凝血中起酶促作用的因子有FⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ、XIII、前激肽释放酶。⑤在凝血中被消耗的因子是Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、XIII；最不稳定的是Ⅴ、Ⅷ。a.凝血酶原激活物生成阶段；b.凝血酶原的激活；c.纤维蛋白的生成Ⅹ模块1内源性凝血系统的检验内源性凝血途径1、静脉采血2、活化部分凝血活酶时间测定（APTT）【质量控制】1．抗凝剂与血液的比例要准确。2．标本放置不宜超过3h，温育时间不宜少于3min。3．分离血浆时，离心速度和时间要够，务必除去血小板，特别是用于肝素治疗监测时。4．若正常对照延长，应重新配制试剂。5．APTT测定因所用的激活剂不同，以及部分凝血活酶来源及制备的不同，均可影响测定结果。6．用自动血液凝固仪测定APTT，可提高检测速度和结果精确性，但仪器本身也会产生一定误差，1995年国际血栓与止血委员会（InternationalCommitteeofThrombosisandHaemostasis,ICTH）和ICSH已开始合作研究应用APTT监测肝素治疗时的标准化问题。【临床意义】基本与凝血时间意义相同，但敏感性高。目前所用的大多数APTT测定方法，凡当血浆凝血因子低于正常水平的15%～30%即可异常。1．APTT延长（超过正常对照10s以上）主要用于发现轻型的血友病。虽可检出因子Ⅷ：C水平低于25%甲型血友病，但对亚临床血友病（因子Ⅷ大于25%）和血友病携带者敏感性欠佳。结果延长也见于因子Ⅸ（血友病乙）、Ⅺ和Ⅻ缺乏症；血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素水平增高时；当凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏时也可延长，但敏感性略差；其他尚有肝病、DIC、大量输入库存血等。2.APTT缩短见于DIC，血栓前状态及血栓性疾病。3.肝素治疗的监护APTT对血浆肝素的浓度很为敏感，故是目前广泛应用的实验室监护指标。此时，要注意APTT测定结果必须与肝素治疗范围的血浆浓度呈线性关系，否则不宜使用。一般在肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.5～3.0倍为宜。模块2外源性凝血系统的检验外源性凝血途径1、静脉采血（同前）2、血浆凝血酶原时间（PT）测定PT测定通常用于以下三种情况：（1）出血性疾病的病情观察和出血及手术时应补何种凝血因子的检查；（2）用于检查肝合成维生素K依赖因子（因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ）是否减少，是维生素K缺乏、肝脏病的一项检查指标；（3）用于缺血性心脏病（如心肌梗塞）和人工瓣膜使用者，在应用双香豆素等口服抗凝剂进行抗凝治疗时的监控项目。【操作方法】1．在试管中加入109mmol/L枸橼酸钠或0.1mol/L草酸钠溶液0.2ml，然后加受检血1.8ml混匀，低速离心，分离血浆。2．取小试管1支，加入血浆和兔脑粉浸出液各0.1ml，37℃预温，再加入0.1mlCaCl2溶液37℃预温，立即开动秒表，不断倾斜试管，至液体流动停止所需时间，即为凝血酶原时间。重复操作2～3次，取平均值，并作正常对照。【临床意义】凝血酶原时间延长（超过正常对照3s以上）见于：1．先天性凝血因子异常，如Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ因子之一或两种以上异常时。但单一凝血因子异常时，其活性要减少到一定水平，PT才延长。如因子I要<1000mg/L，Ⅶ<5%，Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ要<10%。2．后天性凝血因子异常，如严重肝病、维生素K缺乏（慢性胃肠疾患、阻塞性黄疸）、纤溶亢进、DIC后期、血液中抗凝物质增多及使用抗凝药物，如双香豆素类等。模块3血友病病例既往史：平素体健，1