第35卷第1期2003年3月东北师大学报自然科学版Vol.35No.1March2003JOURNALOFNORTHEASTNORMALUNIVERSITY[文章编号]100021832(2003)0120082204苯酚类化合物致突变Ames试验研究112杨丽,徐镜波,刘征涛(11东北师范大学环境科学系,吉林长春130024;21中国环境科学研究院分析测试中心,北京100012)[摘要]采用鼠伤寒沙门氏菌体外回复突变试验(Amestest),对12种苯酚类化合物(5种烷基酚、6种氯酚、1种硝基酚)的致突变性进行了分析.研究结果表明除2,4-二氯苯酚外,其他11种苯酚类化合物对TA98菌株均具有直接致变作用,突变机理可能是移码突变.除此之外,对壬基苯酚对TA97和TA100,4-辛基苯酚对TA97也分别具有阳性诱导作用.[关键词]烷基酚类化合物;氯酚类化合物;Ames试验;致突变性[中图分类号]X17115[文献标识码]A据美国化学文摘社(CAS)统计,截至1990年底,全世界投入生产和销售使用的化学物质总数约为1000万种,其中10万种已投入市场,而且化学物质的总数以每年增加6000种左右的平均速度上升[1].占我国人口死因75%的前四位疾病都与环境污染密切相关,人类的肿瘤80%以上是由于环境因素所引起的,而其中又以化学因素为主[2].此外,污染对人类生殖功能的影响及环境型内分泌干扰素(environmentendocrinedisrupter,简称EED)对野生动物生殖、发育、成长和行为的危害[3],也开始受到科学家的关注.烷基酚类化合物(APS)是烷基酚聚氧乙烯醚(APES)的降解产物,具有雌激素效应[4].APES是一大类表面活性剂家族,广泛用于家庭和工业的清洁产品.氯酚类化合物也是一类重要的环境污染物.它们是一类弱酸性氧化磷酸化解偶联剂,尤其浓缩的五氯苯酚是保存木材时广泛使用的杀菌剂[5].由于烷基酚、氯酚类化合物大量应用于工、农业生产及日常生活中,环境污染广泛,对其进行环境毒理学研究也是十分必要的.本文采用Ames试验的4个标准菌株TA97,TA98,TA100和TA102,应用标准平皿掺入试验对12种苯酚类化合物的致突变效应进行了初步探讨,对其潜在危害和致畸、致癌、致突变影响做出评估.1材料与方法111材料1111待测化合物对甲基苯酚、2,6-二甲基苯酚、4-乙基苯酚、4-辛基苯酚、对壬基[收稿日期]2002209221[基金项目]国家教育部科学技术重点项目(01063),中科院北京生态研究中心开放实验室基金资助项目.[作者简介]杨丽(1977-),女,硕士研究生;徐镜波(1951-),女,教授,主要从事生态毒理学研究.©1995-2005TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.第1期杨丽等:苯酚类化合物致突变Ames试验研究83苯酚、4-硝基苯酚、2-氯苯酚、1,3-二氯苯酚、2,4-二氯苯酚、2,6-二氯苯酚、2,3,4-三氯苯酚和2,3,5,6-四氯苯酚购自德国SIGMA公司.试验前用助溶剂丙酮溶解,再用蒸馏水配制并稀释至所需浓度.11112实验菌株和培养基实验菌株为组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97,TA98,TA100和TA102.菌株由中国预防医学会提供,经鉴定各项遗传特性均符合实验要求,菌株增菌、基因型鉴定及各种试验用培养基均按标准操作[6]11113阳性诱变剂二氨基芴(2-AF),购自德国SIGMA公司..112方法Ames试验选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97,TA98,TA100和TA102四种菌株作为指示菌.某些学者认为TA97和TA98为移码突变型菌株,TA100为碱基置换型[7];某些学者认为TA98为移码突变型菌株,TA97,TA100和TA102为碱基置换型检测菌株[6].本次试验采用标准平皿掺入法进行[6].待测的苯酚类化合物用无菌蒸馏水配成每皿含50μg,100μg和200μg的剂量进行初步筛选,在不加S条件下每一剂量做3皿9平行,试验设自发回变、溶剂丙酮、阳性二氨基芴(2-AF)对照.实验结果以回变菌落数表示,各化合物致突变性以突变率表示.结果判定按每皿回变菌落数为自然回变数的2倍以上(即突变率大于等于2%),并存在剂量-反应关系为阳性.2结果与讨论所测试的12种化合物中,除2,4-二氯苯酚未诱发各菌株的阳性反应外,其余11种待测物均诱发了TA98菌株的阳性反应,说明这11种苯酚类化合物均具有致突变性(见表1).在100μgΠ皿剂量下,对壬基苯酚诱发了TA97,TA