第6讲药理学实验设计（二）随机原则随机是减小实验差异的最基本方法，通过随机的方法，将客观存在的各种差异对实验结果的影响降低到最小。药理学实验中，虽然可以通过各种方法控制实验条件，但仍然不可避免由于各种差异造成的影响，特别是在动物实验中，动物间的个体差异是无法排除的客观存在，可通过随机的方法，分配到各实验组中，使这种差异不至于影响实验结果。在实验过程中实施随机原则，可根据具体实验特点，采用不同的随机方法，实现实验设计和实施过程的随机化。常用的随机分组方法主要有：1、单纯随机分组法：又称完全随机（1）、随机数字表法：（2）、计算机随机数字法：2、简化分层随机分组法：简化均衡随机3、配对随机分组法：4、区组随机分组法：动物编号12345678910随机数字04376088020324179781组别ABAAABABBB11012002181/4=20…..1将第2组的1号动物调到第3组（三）重复原则重复是保证实验结果可靠的重要措施之一，包括重现性和重复数。重现性指的是，在不同空间与时间条件下，按同样的实验方法和条件，可获得同样的实验结果，只有可重现的结果才是科学可靠的，不能重现的结果可能是偶然现象，没有科学价值；重复数指的是，实验要有足够的次数或例数。在实验中要求有一定的重复数，目的是消除个体差异和试验误差，提高实验结果的可靠性。一般，小动物（如小鼠、大鼠）每组10-30例；大动物（犬、猫、羊、猴）每组5-10例。（四）单盲和双盲原则为保证实验结果的可靠性、真实性和科学性，排除研究者或实验对象的主观偏因，实验设计中应依据单盲和双盲原则。单盲试验中，仅受试对象不知道所用的是实验药还是对照药；双盲试验中，受试者、研究者均不知道所用药物是实验药还是对照药，直至试验结束才作统计处理，可排除因主观偏差造成的假阴性或假阳性结论。二、实验药物的给药方法给药的途径、制剂、剂量（1）如有的激素在肝脏内破坏，经口给药就会影响其效果。（2）有些中药用粗制静脉注射，因其成分复杂，如含有钾离子，可以有降血压作用，若把这种非特异性降压作用解释为特殊性疗效就不恰当。这类实验结果如果用口服或由十二指肠给药就可鉴别出来。（3）也有些中药成分在消化道破坏或不被吸收。如枳实中的升压有效成分，对羟福林和N-甲基酪胺只是在静脉注射时才有疗效。（4）有些中药含有大量鞣质，体外试验有抗菌作用，但在体内不被消化道吸收，则没有抗菌作用。（5）给药的次数对一些药物也有关系，如雌三醇与细胞核内物质结合的时间非常短，所以，每天一次给药的效果就比较弱，如将一天剂量分为八次给药，则效果将大大加强。（6）药物的浓度和剂量也是一个重要问题，太高的浓度，太大的剂量都会得出错误的结果。如有用1/2LD50腹腔注射某药物后动物活动减少，认为该药有镇静作用，实际上1/2LD50的剂量已近中毒量，这时动物活动减少，不能认为是镇静的作用。三、实验动物用药量的确定及计算方法（一）动物给药量的确定在观察一个药物的作用时，应该给动物多在的剂量是实验开始时应确定的一个重要问题。剂量太小，作用不明显，剂量太大，又可能引起动物中毒致死，可以按下述方法确定剂量：1．先用小鼠粗略地探索中毒剂量或致死剂量，然后用小于中毒量的剂量，或取致死量的若干分之一为应用剂量，一般可取1/10-1/5。2．植物药粗制剂的剂量多按生药折算。3．化学药品可参考化学结构相似的已知药物，特别是化学结构和作用都相似的药物的剂量。4．确定剂量后，如第一次实验的作用不明显，动物也没有中毒的表现（体重下降、精神不振、活动减少或其他症状），可以加大剂量再次实验。如出现中毒现象，作用也明显，则应降低剂量再次实验。在一般情况下，在适宜的剂量范围内，药物的作用常随剂量的加大而增强。所以有条件时，最好同时用几个剂量作实验，以便迅速获得关于药物作用的较完整的资料。如实验结果出现剂量与作用强度之间毫无规律时，则更应慎重分析。5．用大动物进行实验时，开始的剂量可采用给鼠类剂量的十五分之一～二分之一，以后可根据动物的反应调整剂量。6．确定动物给药剂量时，要考虑给药动物的年龄大小和体质强弱。一般说确定的给药剂量是指成年动物的，如是幼小动物，剂量应减少。如以狗为例：6个月以上的狗给药量为1份时，3-6个月的给1/2份，45-89日1/4份，20-44日的给1/8份，10-19日的给1/16份。7．确定动物给药剂量时，要考虑因给药途径不同，所用剂量也不同，以口服量为100时，灌肠量应为100-200，皮下注射量30-50，肌肉注射量为25-30，静脉注射量为25。常用实验动物的最大给药量和使用针头规格（二）实验动物用药量的计算方法动物实验所用的药物剂量，一般按mg/kg体重或g