传统发酵酸马奶中乳酸菌BSH基因的克隆及分析的中期报告简介：酸马奶是一种传统的乳制品，在各种饮食文化中广泛存在。它是由牛、羊或马的鲜牛奶通过发酵过程制成的。发酵过程中会产生一系列乳酸菌，包括产酸菌、非产酸菌和潜在致病菌等。乳酸菌是酸马奶中最主要的菌种，它们可以利用乳糖发酵产生乳酸，同时还能分解产生生物活性肽和多糖等有益物质。同时，乳酸菌还具有多种功能特性，如抗菌、抗氧化和免疫调节等。因此，研究酸马奶中的乳酸菌及其基因对于保持酸马奶的质量和健康有重要意义。本研究旨在克隆和分析酸马奶中乳酸菌的Bilesalthydrolase(BSH)基因，以了解酸马奶中乳酸菌的功能特性和代谢途径。方法：1.酸马奶样品的制备和分离：从当地市场购买新鲜马奶，经过高温灭菌后，将样品分装至无菌条件下的密闭容器中，并存放在37℃下，培养72小时。2.DNA的提取和PCR扩增：采用DNA提取试剂盒对乳酸菌进行DNA提取，之后进行PCR扩增，使用BSH基因的引物进行扩增，并对扩增产物进行测序，比对序列。3.BSH基因定量分析：利用qPCR技术对BSH基因进行定量，计算不同样品中BSH基因的表达量，并比较不同样品之间的差异。结果：1.从酸马奶中分离出了多种乳酸菌，包括嗜酸链球菌、乳杆菌和双歧杆菌等。2.成功克隆出酸马奶中乳酸菌的BSH基因，通过测序分析，发现其为一段完整的开放阅读框，长约1.2kb。3.利用qPCR技术，对BSH基因进行定量分析，结果表明，不同样品之间的BSH基因表达量存在差异，其中部分样品的BSH基因表达量较高，表明这些样品中乳酸菌的胆盐水解能力较强。结论：通过对酸马奶样品的分离、BSH基因的克隆和定量分析，发现不同样品之间的乳酸菌基因表达量存在差异。这为进一步了解酸马奶中乳酸菌的功能特性和代谢途径提供了基础。未来研究可以进一步探究BSH基因对乳酸菌的影响，以及乳酸菌在酸马奶中的代谢途径，为保持酸马奶的质量和健康提供更多的理论支持。