阿莫西林的含量测定方案一、设计背景阿莫西林（结构式见图1）又名安莫西林或安默西林，是20世纪70年代开发的半合成青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素，原料药为一种白色粉末。本品在酸性环境下稳定，在胃肠道中的吸收率高达百分之九十。阿莫西林有极强的杀菌效果，且可穿透细胞，具有较强的杀灭溶血链球菌、肠球菌、肺炎球菌、沙门菌属、幽门螺旋杆菌等的作用，常用于治疗上、下呼吸道感染、皮肤软组织感染、急性单纯性淋病、泌尿生殖道感染等；还可用于治疗伤寒、伤寒带菌者及钩端螺旋体病；阿莫西林亦可与克拉霉素、兰索拉唑三联用药根除胃、十二指肠幽门螺杆菌，降低消化道溃疡复发率。由于阿莫西林具有杀菌力强、口服吸收快,、毒副作用低等特点，已经迅速发展成为最常用的口服抗生素之一，在半合成青霉素类抗生素中占据主导地位。阿莫西林在1995年被中华医学会推荐为抗感染首选药物，目前也是世界卫生组织推荐的首选β-内酰胺类口服抗生素之一。现在一般将阿莫西林制作为胶囊、颗粒、片剂、分散片等应用于临床，常与克拉维酸合用制成分散片使用。制剂产品的高质量离不开优质的原料药，故本方案拟对阿莫西林原料药的含量测定方法进行设计，旨在为阿莫西林质量标准的提高提供一定法参考依据。图1阿莫西林二、设计依据阿莫西林为β-内酰胺类抗生素，临床疗效好，且口服不易过敏。经查阅相关期刊文献及《中国药典》（2020版），了解到阿莫西林的质量标准已收录到《中国药典》（2020版），且目前有关阿莫西林的含量测定方法主要是高效液相色谱法。考虑到高效液相色谱法具有专属性好、准确度高、精密度高、样品分析速度快等优点，且常用的高效液相色谱仪配备的检测器一般为紫外检测器，阿莫西林具有紫外吸收，故本方案主要参考《中国药典》(2020版）第二部阿莫西林项下含量测定的方法和相关参考文献资料进行设计，制定阿莫西林的含量测定方案，旨在为阿莫西林的质量标准提高提供一定的参考依据。三、设计方案1.材料和仪器（1）仪器十万分之一电子天平（型号：ESJ100-4B，厂家：沈阳神宇龙腾天平有限公司），高效液相色谱仪（紫外检测器）（型号：安捷伦1260，厂家：美国安捷伦科技有限公司）（见图2）。图2高效液相色谱仪（2）材料阿莫西林对照品（中国食品药品检定研究院，纯度：86.9%），阿莫西林原料药（武汉英和制药有限公司），甲醇（色谱纯，上海迈瑞尔化学技术有限公司），乙腈（色谱纯，天津益仁达化工有限公司），磷酸二氢钾、氢氧化钾均为分析纯，购于国药集团，水为纯化水。2.色谱条件（1）色谱柱：C18柱（长250mm，内径4.6mm，填料粒径5μm）。（2）流动相：以0.05mol/l磷酸二氢钾溶液（用2mol/l氢氧化钾溶液调节pH至5.0）-乙腈（97.5%∶2.5%）为流动相，可根据试验结果适当调整乙腈的比例。（3）流速：1.0ml/min。（4）柱温：30℃。（5）检测波长：254nm(阿莫西林的最大吸收波长处）。（6）进样室温度：室温。（7）进样体积：20μl。3.溶液的配制（1）供试品溶液的制备取本品适量（约相当于阿莫西林25mg，按N16H19N3O5S计），精密称定，置于50ml的容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度线，摇匀，作为供试品溶液，备用。（2）对照品溶液的制备取阿莫西林对照品适量（约相当于阿莫西林25mg，按N16H19N3O5S计），精密称定，加流动相溶解并定量稀释至刻度线，制成每1ml中约含阿莫西林（按N16H19N3O5S计）0.5mg/ml的对照品溶液，备用。4.测定方法（1）仪器操作步骤①开机②按要求装好流动相，设置流动体积，检查溶剂托盘上的溶剂是否足量，按上述色谱条件的要求设置流动相比例，逐渐将流速增大至1.0ml/min，设置色谱柱温为30℃、进样体积20μl。③平衡色谱柱约30min左右，监视基线，待压力线和信号线平整，准备实验。④将配制好的供试品溶液、对照品溶液依序放置于样品架上；新建分析序列，选择其对应的采集方法和图谱处理法，编辑样品信息并复核；样品信息包括进样顺序、样品名、样品架位置、采集方法名、图谱处理方法名、进样量等，打开氚灯并设置检测波长为254nm，等待系统基线走稳。⑤所有样品分析结束后，关闭检测器；更换流动相为甲醇：水（10∶90）冲洗30min，再用纯甲醇冲洗60min；关机。（2）外标法计算公式如下注：CR：对照品溶液的浓度；AR：对照品峰面积；AX：供试品峰面积；V：初配体积（50ml）；D：稀释倍数（1）。5.方法学考察（1）专属性试验取上述制备的阿莫西林对照品溶液、供试品溶液及流动